公开(公告)号：CN119144579B

公开(公告)日：2025-03-14

申请号：CN202411450233.1

申请日：2024-10-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 班宵逢 ,  韦磊 ,  李兆丰 ,  李才明 ,  顾正彪 ,  洪雁 ,  程力 ,  田一雄

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/04 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种胞外分泌能力和酶活性提高的淀粉分支酶突变体。本发明对来源于热葡萄糖苷土杆菌Geobacillus thermoglucosidans的淀粉分支酶进行定点突变，突变位点为第159位、374位、393位、426位和432位的赖氨酸，分别检测突变体粗酶活后发现突变体K159A和K159H在枯草芽孢杆菌胞外表达量较野生型得到明显提升。进一步利用疏水柱和阴离子柱对粗酶液进行纯化，突变体K159A和K159H的纯酶比酶活分别达到1745.18U/mg和1873.78U/mg。本发明提供的淀粉分支酶突变体，其胞外表达能力和比酶活都在野生型的基础上得到提升，能够将其应用于马铃薯支链淀粉的改性，有利于淀粉分支酶在工业上的应用。

公开(公告)号：CN119144579A

公开(公告)日：2024-12-17

申请号：CN202411450233.1

申请日：2024-10-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 班宵逢 ,  韦磊 ,  李兆丰 ,  李才明 ,  顾正彪 ,  洪雁 ,  程力 ,  田一雄

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/18 ,  C12P19/04 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种胞外分泌能力和酶活性提高的淀粉分支酶突变体。本发明对来源于热葡萄糖苷土杆菌Geobacillus thermoglucosidans的淀粉分支酶进行定点突变，突变位点为第159位、374位、393位、426位和432位的赖氨酸，分别检测突变体粗酶活后发现突变体K159A和K159H在枯草芽孢杆菌胞外表达量较野生型得到明显提升。进一步利用疏水柱和阴离子柱对粗酶液进行纯化，突变体K159A和K159H的纯酶比酶活分别达到1745.18U/mg和1873.78U/mg。本发明提供的淀粉分支酶突变体，其胞外表达能力和比酶活都在野生型的基础上得到提升，能够将其应用于马铃薯支链淀粉的改性，有利于淀粉分支酶在工业上的应用。