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公开(公告)号：CN117448303A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311326116.X
申请日：2023-10-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种嗜热II型普鲁兰酶的分子改造及其在淀粉制糖中的应用，属于基因工程技术及制糖工业领域。本发明对超嗜热古菌(Pyrococcusyayanosii)CH1来源的II型普鲁兰酶进行突变得到突变体W30L/H400I/S552A。该突变体的比活和催化效率与野生型相比，分别提高了3.2倍和5倍。利用该酶突变体生产低聚麦芽糖的反应显示，酶突变体低聚麦芽糖的转化率达到96.1％，比野生型提高了5.4％。此外，将酶突变体用于葡萄糖生产时，该酶突变体的葡萄糖产量分别比野生型和传统方法提高25.4％和43.5％。表明了该酶的突变体在淀粉糖工业中应用中存在巨大潜力。
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公开(公告)号：CN114250215B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202111483679.0
申请日：2021-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对超嗜热II型普鲁兰酶进行氨基酸突变，获得了超嗜热II型普鲁兰酶突变体Q13H、I25E和Q13H/I25E。本发明获得的突变体催化性能有了很大的提高，且突变体在反应过程中不需要其他金属离子辅助(例如Ca2+)，有助于降低产物提取成本。本发明构建的突变体具有极强的热稳定性，在100℃保温10h还剩余50％的酶活，并具有较为广泛的pH活性范围和pH耐受性，在pH 5.8‑7.0范围保有70％活性，于不同的pH下，4℃放置剩余酶活均在75％以上，能很好的应用于淀粉工业中的糖化过程中。
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公开(公告)号：CN114250215A
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202111483679.0
申请日：2021-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对超嗜热II型普鲁兰酶进行氨基酸突变，获得了超嗜热II型普鲁兰酶突变体Q13H、I25E和Q13H/I25E。本发明获得的突变体催化性能有了很大的提高，且突变体在反应过程中不需要其他金属离子辅助(例如Ca2+)，有助于降低产物提取成本。本发明构建的突变体具有极强的热稳定性，在100℃保温10h还剩余50％的酶活，并具有较为广泛的pH活性范围和pH耐受性，在pH 5.8‑7.0范围保有70％活性，于不同的pH下，4℃放置剩余酶活均在75％以上，能很好的应用于淀粉工业中的糖化过程中。
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公开(公告)号：CN109880783B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201910318050.7
申请日：2019-04-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/56 , C12N9/44 , C12N15/70 , C12P19/14 , C12P19/00 , C12P19/04 , C12P7/48 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种嗜热重组II型普鲁兰酶及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中异源表达II型普鲁兰酶，获得一种嗜热重组II型普鲁兰酶，其最适pH为6.6，在pH 5.8‑8.0条件下有较好的pH耐受性，最适温度为95℃，在95℃保温10h，剩余酶活大于50％，能够在强还原条件下展现出较高的比酶活，如在培养环境中加入DTT，能使Sumo‑PulPy比酶活提升237.2％。本发明还提供了II型普鲁兰酶Sumo‑PulPy的组合截断突变体△28N+△791C，该酶突变体的比酶活为32.18±0.92U/mg，是野生酶的5.99倍，具有重要的工业应用价值和潜力。
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