公开(公告)号：CN112813041B

公开(公告)日：2022-03-18

申请号：CN202011620794.3

申请日：2020-12-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 李会 ,  许正宏 ,  刘伟 ,  史劲松 ,  薛苗苗 ,  龚劲松 ,  张晓梅

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/74 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P33/18 ,  C12R1/125 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体和工程菌及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy的L173位点突变成了缬氨酸，得到突变体17β‑HSDy2，并将此突变体进行外源表达，重组菌B.Subtilis‑pMA5‑17β‑HSDy2的比酶活达到6882.45U·mg‑1，酶活提高16.4％。本发明还提供了突变体17β‑HSDy2的增强表达菌株，以pMV261为增强表达质粒，实现了突变体17β‑HSDy2在分枝杆菌LY‑1中的增强表达，相较于原始菌株显著的降低了9α‑羟基雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮的积累，提高了睾酮积累。该增强表达菌株还可用于雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮转化睾酮的生产，具有潜在工业应用。

公开(公告)号：CN112921011A

公开(公告)日：2021-06-08

申请号：CN202110376599.9

申请日：2021-04-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 许正宏 ,  李会 ,  薛苗苗 ,  史劲松 ,  刘伟 ,  张晓梅 ,  徐国强

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体和工程菌及应用，属于酶工程技术领域。本发明的分枝杆菌(Mycobacterium)LY‑1的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体是将3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的320位天冬氨酸突变成了酪氨酸，得到3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体KstD1；以pET32a为表达质粒，以大肠杆菌BL21为表达宿主，实现分枝杆菌LY‑1中3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的异源表达，重组菌大肠杆菌BL21‑pET32a‑KstD1能够在短时间内转化高浓度的C1,2‑位脱氢甾体化合物，且转化率达到98％，降低了生产成本，具有重要的工业应用价值。

公开(公告)号：CN112813041A

公开(公告)日：2021-05-18

申请号：CN202011620794.3

申请日：2020-12-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 李会 ,  许正宏 ,  刘伟 ,  史劲松 ,  薛苗苗 ,  龚劲松 ,  张晓梅

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/74 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P33/18 ,  C12R1/125 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体和工程菌及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将分枝杆菌(Mcobacterium sp.)LY‑1的17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy的L173位点突变成了缬氨酸，得到突变体17β‑HSDy2，并将此突变体进行外源表达，重组菌B.Subtilis‑pMA5‑17β‑HSDy2的比酶活达到6882.45U·mg‑1，酶活提高16.4％。本发明还提供了突变体17β‑HSDy2的增强表达菌株，以pMV261为增强表达质粒，实现了突变体17β‑HSDy2在分枝杆菌LY‑1中的增强表达，相较于原始菌株显著的降低了9α‑羟基雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮的积累，提高了睾酮积累。该增强表达菌株还可用于雄甾烯‑4‑烯‑3，17‑二酮转化睾酮的生产，具有潜在工业应用。

公开(公告)号：CN119331850A

公开(公告)日：2025-01-21

申请号：CN202411712933.3

申请日：2024-11-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏伟 ,  吴敬 ,  胡康琦 ,  薛苗苗 ,  颜正飞 ,  陈晟

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  B09B3/60 ,  C12R1/19 ,  B09B101/75

Abstract: 本发明公开了对聚酯塑料降解效率提高的角质酶突变体及其应用，属于环境科学领域。本发明以来源于枝叶堆肥宏基因组来源LCC的突变体ICCG为亲本酶，对其第48位、第75位、第100位、第247位中的一个或多个氨基酸进行突变，构建了突变体。与亲本ICCG相比，本发明构建的突变体M8～M14对降解PET、PTT、PBT和PBAT等聚酯的效率均有显著提升，最高降解率分别达到86.87％、52.38％、64.84％和69.27％，具有良好的工业前景。

公开(公告)号：CN116814587A

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202310791375.3

申请日：2023-06-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏伟 ,  吴敬 ,  王慧 ,  薛苗苗 ,  陈晟 ,  颜正飞

IPC: C12N9/16 ,  C08J11/10 ,  C08L67/02 ,  C12N15/70 ,  B09B3/60 ,  B09B101/75

Abstract: 本发明公开了一种聚酯降解酶突变体及其在聚酯塑料降解中的应用，属于环境科学领域。本发明通过对ICCG的底物结合位点附近第59位、第192位、第217位、第218位氨基酸进行单点或多点突变，构建得到的突变体对降解PBAT和PET的效率有了显著提升，对PET的降解率达59.17％以上，对PBAT的降解率达47％以上，具有巨大的工业应用前景。

公开(公告)号：CN112921011B

公开(公告)日：2022-05-06

申请号：CN202110376599.9

申请日：2021-04-07

Applicant: 江南大学

Inventor： 许正宏 ,  李会 ,  薛苗苗 ,  史劲松 ,  刘伟 ,  张晓梅 ,  徐国强

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体和工程菌及应用，属于酶工程技术领域。本发明的分枝杆菌(Mycobacterium)LY‑1的3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体是将3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶的320位天冬氨酸突变成了酪氨酸，得到3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体KstD1；以pET32a为表达质粒，以大肠杆菌BL21为表达宿主，实现分枝杆菌LY‑1中3‑甾酮‑Δ1‑脱氢酶突变体的异源表达，重组菌大肠杆菌BL21‑pET32a‑KstD1能够在短时间内转化高浓度的C1,2‑位脱氢甾体化合物，且转化率达到98％，降低了生产成本，具有重要的工业应用价值。

公开(公告)号：CN119530120A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411712936.7

申请日：2024-11-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏伟 ,  吴敬 ,  薛苗苗 ,  胡康琦 ,  颜正飞 ,  陈晟

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/55 ,  C12N9/18 ,  C12N9/96 ,  B09B3/60 ,  C12R1/19 ,  B09B101/75

Abstract: 本发明公开了阿魏酸酯酶发酵制备及其在聚酯塑料降解中的应用，属于环境科学领域。本发明通过发酵制备来源于Anaerocellum thermophilum的阿魏酸酯酶FAE4，并与不同来源的降解聚酯塑料寡聚体的同聚酯降解酶复配，获得了对聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯或含有聚己二酸/对苯二甲酸丁二醇酯(PBAT)降解效率和终产物含量比例显著提升的复配反应体系，具有良好的工业前景。