公开(公告)号：CN110982768B

公开(公告)日：2022-04-05

申请号：CN201911337548.4

申请日：2019-12-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 张伟国 ,  史可 ,  王颖妤 ,  徐建中 ,  章洁颖 ,  朱晗

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/90 ,  C12N15/54 ,  C12N15/52 ,  C12P13/06 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L‑亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L‑亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L‑亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L‑亮氨酸产生菌中L‑缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL‑14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL‑8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL‑14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。

公开(公告)号：CN110982768A

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN201911337548.4

申请日：2019-12-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 张伟国 ,  史可 ,  王颖妤 ,  徐建中 ,  章洁颖 ,  朱晗

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12N15/90 ,  C12N15/54 ,  C12N15/52 ,  C12P13/06 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及一种强化谷氨酸棒杆菌中丙酮酸合成L-亮氨酸能力的方法，属于基因工程领域。本发明应用基因工程方法，为调控L-亮氨酸合成代谢通量，在ilvBNC操纵子和leuA基因的启动子序列位点替换为Ptuf启动子；同时为进一步强化丙酮酸合成亮氨酸代谢通量，过表达关键酶基因异丙基苹果酸合成酶IPMS。构建了高效的L-亮氨酸合成途径并弱化了谷氨酸棒杆菌L-亮氨酸产生菌中L-缬氨酸的合成通量。重组菌经发酵摇瓶实验，重组菌株WL-14产28.47±0.36g/L亮氨酸，比出发菌株WL-8的亮氨酸产量提高56.8％，而菌株WL-14中缬氨酸积累量降低到1.78±0.21g/L。

公开(公告)号：CN110643648A

公开(公告)日：2020-01-03

申请号：CN201911024821.8

申请日：2019-10-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐建中 ,  史可 ,  王颖妤 ,  章洁颖 ,  郝宇晨 ,  张伟国

IPC: C12P13/06 ,  C12N15/01 ,  C12N1/36 ,  C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种高效利用淀粉生产L-亮氨酸的方法，属于生物催化技术领域。本发明通过对棒杆菌属的L-亮氨酸产生菌进行温度诱导的适应性进化处理，提高菌株对高温的耐受性。随后，在此突变菌株基础上异源表达来源于芽孢杆菌属微生物(如B.amyloliquefaciens)中α-淀粉酶编码基因，在棒杆菌属的L-亮氨酸产生菌中构建了可高效利用淀粉的代谢途径，从而改善了最适菌体生长温度与α-淀粉酶最适作用温度不一致的的缺点，获得了高效利用淀粉生产L-亮氨酸的重组谷氨酸棒杆菌。