公开(公告)号：CN113528477B

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202110958714.3

申请日：2021-08-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏雨 ,  何瑞 ,  吴梓凤 ,  王周平 ,  秋杨煜 ,  程倩倩

IPC: C12N9/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  A23L5/20

Abstract: 本发明公开了一种能降解黄曲霉毒素B1的锰过氧化物酶的突变体构建方法及其应用，属于生物遗传工程技术。本发明提供了一种降解率提高的降解黄曲霉毒素B1的锰过氧化物酶的突变体，所述突变体具有如下至少一个位点的突变：N105G、N112D、H197D、K204V或T243Q。采用本发明提供的锰过氧化物酶突变体，在相同条件下与未突变的锰过氧化物酶具有相似或较高的催化活性，重组酶表达的锰过氧化物酶酶活显著提高。本发明通过分析有针对性的对锰过氧化物酶PhcMnp的氨基酸残基或结构进行改进，通过基因工程方法来获得突变体，所得突变体对黄曲霉毒素B1的较高降解效率等特性更加适应工业化生产。

公开(公告)号：CN113563481B

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN202110800161.9

申请日：2021-07-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏雨 ,  吴梓凤 ,  秋杨煜 ,  何瑞 ,  程倩倩 ,  王周平

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  A23L5/20 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种能同时降解黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的融合酶的突变体构建方法及其应用，属于生物技术和基因工程技术领域。本发明通过将玉米赤霉烯酮水解酶ZHD101.1和锰过氧化物酶PhcMnp两种酶进行融合，得到的融合酶能够同时降解玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1，并对该融合酶进行突变，通过食品级酵母菌乳酸克鲁维酵母发酵生产融合酶突变体，得到的融合酶突变体，不仅对于玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1的降解效率较出发酶均得到了显著提升，且表达的产物具有食品级安全性，适用于食品、饲料等领域，对于食品安全具有重要意义。

公开(公告)号：CN113564143A

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN202110789525.8

申请日：2021-07-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏雨 ,  吴梓凤 ,  何瑞 ,  秋杨煜 ,  程倩倩 ,  王周平

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  A23L5/20 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种能降解玉米赤霉烯酮的水解酶的突变体构建方法及其应用，属于生物技术和基因工程技术。本发明提供的玉米赤霉烯酮水解酶突变体相对于未突变的水解酶具有相似或较高的催化活性，对于玉米赤霉烯酮的降解率显著提高。本发明将获得的玉米赤霉烯酮水解酶突变体在食品级酵母菌乳酸克鲁维酵母中实现了酶的分泌表达，表达产物具有食品级安全性，适合在食品和饲料等行业中应用。

公开(公告)号：CN113564143B

公开(公告)日：2023-08-25

申请号：CN202110789525.8

申请日：2021-07-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏雨 ,  吴梓凤 ,  何瑞 ,  秋杨煜 ,  程倩倩 ,  王周平

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  A23L5/20 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种能降解玉米赤霉烯酮的水解酶的突变体构建方法及其应用，属于生物技术和基因工程技术。本发明提供的玉米赤霉烯酮水解酶突变体相对于未突变的水解酶具有相似或较高的催化活性，对于玉米赤霉烯酮的降解率显著提高。本发明将获得的玉米赤霉烯酮水解酶突变体在食品级酵母菌乳酸克鲁维酵母中实现了酶的分泌表达，表达产物具有食品级安全性，适合在食品和饲料等行业中应用。

公开(公告)号：CN113563481A

公开(公告)日：2021-10-29

申请号：CN202110800161.9

申请日：2021-07-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏雨 ,  吴梓凤 ,  秋杨煜 ,  何瑞 ,  程倩倩 ,  王周平

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  A23L5/20 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种能同时降解黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的融合酶的突变体构建方法及其应用，属于生物技术和基因工程技术领域。本发明通过将玉米赤霉烯酮水解酶ZHD101.1和锰过氧化物酶PhcMnp两种酶进行融合，得到的融合酶能够同时降解玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1，并对该融合酶进行突变，通过食品级酵母菌乳酸克鲁维酵母发酵生产融合酶突变体，得到的融合酶突变体，不仅对于玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素B1的降解效率较出发酶均得到了显著提升，且表达的产物具有食品级安全性，适用于食品、饲料等领域，对于食品安全具有重要意义。

公开(公告)号：CN113528477A

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202110958714.3

申请日：2021-08-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 夏雨 ,  何瑞 ,  吴梓凤 ,  王周平 ,  秋杨煜 ,  程倩倩

IPC: C12N9/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/81 ,  A23L5/20

Abstract: 本发明公开了一种能降解黄曲霉毒素B1的锰过氧化物酶的突变体构建方法及其应用，属于生物遗传工程技术。本发明提供了一种降解率提高的降解黄曲霉毒素B1的锰过氧化物酶的突变体，所述突变体具有如下至少一个位点的突变：N105G、N112D、H197D、K204V或T243Q。采用本发明提供的锰过氧化物酶突变体，在相同条件下与未突变的锰过氧化物酶具有相似或较高的催化活性，重组酶表达的锰过氧化物酶酶活显著提高。本发明通过分析有针对性的对锰过氧化物酶PhcMnp的氨基酸残基或结构进行改进，通过基因工程方法来获得突变体，所得突变体对黄曲霉毒素B1的较高降解效率等特性更加适应工业化生产。