公开(公告)号：CN120026039A

公开(公告)日：2025-05-23

申请号：CN202510179502.3

申请日：2025-02-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 王羽嘉 ,  李会 ,  颜菲鹆 ,  许礼阳 ,  张晓梅 ,  史劲松 ,  许正宏

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/74 ,  C12N15/113 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明公布了一种基于同源重组修复机制的CRISPR‑Cas12a基因编辑系统及在新金分枝杆菌中应用。利用CRISPR技术与同源重组(HR)修复机制偶联，实现了对新金分枝杆菌基因的高效、快速的遗传操作。该CRISPR‑Cas12a系统筛选内源性的启动子成功实现了FnCas12a和crRNA的分别表达，并通过表达HR元件Che9c和敲除Ku基因介导的非同源末端修复机制关键基因提升HR修复效率，从而实现了精确的靶基因编辑。同时，筛选适合的PAM序列识别位点和crRNA长度提高了靶基因的编辑效率，为研究新金分枝杆菌提供了有效的技术手段。