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公开(公告)号：CN113736818A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111179096.9
申请日：2021-10-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在毕赤酵母中提高人源溶菌酶分泌效率及酶活的方法，包括如下步骤：构建质粒、启动子替换、重组质粒导入菌株中、验证重组质粒表达、信号肽优化、基因敲除、伴侣蛋白共表达、发酵条件优化等。本发明提供的技术方案有着极高的提高人源溶菌酶分泌效率及酶活的效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113801801B
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202111170832.4
申请日：2021-10-08
Applicant: 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高效生产碱性果胶酶的重组菌及其应用，所述重组菌是将枯草芽孢杆菌碱性果胶酶基因的突变体pelA*连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K，并优化信号肽种类(MF4I、HFBI、W1、Albumin和Invertase 2)及伴侣因子(BMH2、HAC1、PDI1和KEX2)，转化至重组表达碱性果胶酶的毕赤酵母中。本发明主要采用信号肽、共表达分子伴侣等策略提高了碱性果胶酶在毕赤酵母中的分泌表达水平。
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公开(公告)号：CN113736817B
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202111171921.0
申请日：2021-10-08
Applicant: 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及一种毕赤酵母中提高碱性脂肪酶分泌效率及酶活的方法，本发明的碱性脂肪酶LIP1碱基序列如SEQ ID NO:1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明基于组合优化策略对脂肪酶LIP1依次经过密码子偏好性优化、基因多拷贝积累、更换分泌作用更强的信号肽以及分子伴侣共表达等优化提高其在毕赤酵母中的分泌效率及酶活，实现脂肪酶LIP1在重组酵母中高效表达和积累。
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公开(公告)号：CN113604373A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110172532.3
申请日：2021-02-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种提高人源溶菌酶产量及酶活的毕赤酵母缺陷型菌株，其包括如下步骤：构建质粒、出发菌株构建、敲除质粒构建、单敲除菌株构建、阳性克隆子筛选，其中选择的菌株为毕赤酵母，敲除的基因为VPS10和或VPS10‑2Δ，本发明提供的制得的加工后菌株有着较高的产量和酶活，能够显著改善人源溶菌酶目前产量和酶活严重不足的情况。
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公开(公告)号：CN113801801A
公开(公告)日：2021-12-17
申请号：CN202111170832.4
申请日：2021-10-08
Applicant: 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株高效生产碱性果胶酶的重组菌及其应用，所述重组菌是将枯草芽孢杆菌碱性果胶酶基因的突变体pelA*连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K，并优化信号肽种类(MF4I、HFBI、W1、Albumin和Invertase 2)及伴侣因子(BMH2、HAC1、PDI1和KEX2)，转化至重组表达碱性果胶酶的毕赤酵母中。本发明主要采用信号肽、共表达分子伴侣等策略提高了碱性果胶酶在毕赤酵母中的分泌表达水平。
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公开(公告)号：CN113736817A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202111171921.0
申请日：2021-10-08
Applicant: 枣庄市杰诺生物酶有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及一种毕赤酵母中提高碱性脂肪酶分泌效率及酶活的方法，本发明的碱性脂肪酶LIP1碱基序列如SEQ ID NO:1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明基于组合优化策略对脂肪酶LIP1依次经过密码子偏好性优化、基因多拷贝积累、更换分泌作用更强的信号肽以及分子伴侣共表达等优化提高其在毕赤酵母中的分泌效率及酶活，实现脂肪酶LIP1在重组酵母中高效表达和积累。
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