公开(公告)号：CN113881613B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202110396678.6

申请日：2021-04-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  王阳 ,  堵国成 ,  汪昊 ,  陈坚

IPC: C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种微生物发酵法生产制备超高分子量透明质酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明在谷氨酸棒杆菌中游离表达透明质酸合酶编码基因pmhasA，构建了透明质酸的合成途径；采取弱化RBS强度的方法，弱化合酶pmHAS的表达；采取定点突变的策略理性改造透明质酸合成酶编码基因pmhasA；在谷氨酸棒杆菌中通过组合调控策略强化表达前体UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰葡萄糖胺的合成途径酶编码基因；对发酵工艺进行优化，采取低温发酵的策略；重组谷氨酸棒杆菌生产的透明质酸分子量达到5‑9MDa。本发明构建的重组谷氨酸棒杆菌适合于工业化生产应用。

公开(公告)号：CN113881613A

公开(公告)日：2022-01-04

申请号：CN202110396678.6

申请日：2021-04-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  王阳 ,  堵国成 ,  汪昊 ,  陈坚

IPC: C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种微生物发酵法生产制备超高分子量透明质酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明在谷氨酸棒杆菌中游离表达透明质酸合酶编码基因pmhasA，构建了透明质酸的合成途径；采取弱化RBS强度的方法，弱化合酶pmHAS的表达；采取定点突变的策略理性改造透明质酸合成酶编码基因pmhasA；在谷氨酸棒杆菌中通过组合调控策略强化表达前体UDP‑葡萄糖醛酸和UDP‑N‑乙酰葡萄糖胺的合成途径酶编码基因；对发酵工艺进行优化，采取低温发酵的策略；重组谷氨酸棒杆菌生产的透明质酸分子量达到5‑9MDa。本发明构建的重组谷氨酸棒杆菌适合于工业化生产应用。