公开(公告)号：CN117467682A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311398501.5

申请日：2023-10-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  唐蜜 ,  潘学玮 ,  杨田金 ,  孙启盛 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N15/60 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P13/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于N端编码序列增强L‑色氨酸合成的方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑色氨酸合成关键限速酶邻氨基苯甲酸合酶TrpE的N端编码序列前随机添加10个氨基酸的核苷酸序列，并与绿色荧光蛋白进行融合，构建TrpE‑NCS随机突变文库，最终筛选得到表达强度最高的N端编码序列序列比对照菌株约高出6.2倍。最后，将筛选得到的最优N端编码序列插入到基因trpE的N端，明显增强了ANTA合酶的表达，构建得到的工程菌株TRP08的L‑色氨酸产量在5L发酵罐中可达16.28g/L，约比对照菌株提高18.06％。综上，N端编码序列可作为合成生物学元件用于代谢途径的基因表达调控。

公开(公告)号：CN117467588A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311398492.X

申请日：2023-10-25

Applicant: 江南大学

Inventor： 饶志明 ,  唐蜜 ,  潘学玮 ,  杨田金 ,  孙启盛 ,  徐美娟 ,  杨套伟 ,  张显

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12P13/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于转录调控因子TrpR2调节L‑色氨酸合成的方法，属于生物工程技术领域。本发明在L‑色氨酸生产菌株TRP10中对转录调控因子TrpR2进行敲除发现，构建得到的工程菌株TRP11能够显著提高L‑色氨酸的产量，于5L发酵罐中培养48h后测定发现L‑色氨酸产量提高至23.33g/L，比对照菌株的L‑色氨酸产量提高18.20％。同时，TrpR2的敲除不会影响发酵过程中菌株的生长。通过敲除转录因子TrpR2间接影响了L‑色氨酸合成的关键基因，从而影响了L‑色氨酸的合成。综上，采用转录因子工程策略在增强目标产物的合成中具有极大潜力。