公开(公告)号：CN118109492A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202410206644.X

申请日：2024-02-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 肖丰旭 ,  李由然 ,  石贵阳 ,  刘苏鑫 ,  李晨星 ,  张玉鹏 ,  丁重阳 ,  张梁

IPC: C12N15/55 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/10

Abstract: 本发明属于基因技术领域，公开了一种地衣芽胞杆菌基因组编辑载体，包括PN2启动子介导的crRNA表达盒，以及Pmal启动子介导的Cas12a(Cpf1)表达盒，同源修复序列均位于同一载体质粒中。重组的载体质粒进入地衣芽孢杆菌细胞后，Cas12a(Cpf1)在麦芽糖诱导下表达，并在crRNA引导下识别并剪切PAM(5’‑TTTV)序列，只有发生同源修复的转化子才得以存活下来，从而完成了目的基因敲除或插入。本发明所构建的CRISPR‑Cas12a(Cpf1)系统针对同一位点的敲除效率均为100％，与现有地衣芽孢杆菌基因组编辑系统相比，更加高效，更加便捷。