公开(公告)号：CN109370972A

公开(公告)日：2019-02-22

申请号：CN201811375476.8

申请日：2018-11-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 诸葛斌 ,  操小超 ,  宗红 ,  陆信曜

IPC: C12N1/21 ,  C12P7/40 ,  C12P7/42 ,  C12P7/44 ,  C12P7/18 ,  C12P7/62 ,  C12R1/02

Abstract: 本发明涉及一种醋酸杆菌工程菌及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过构建基因敲除质粒，该敲除质粒依次含有醋酸杆菌gdh基因同源重组前臂、标记基因和gdh基因同源重组后臂、载体；将构建成功的基因敲除质粒转入醋酸杆菌电转感受态细胞，自杀质粒利用两次同源重组将基因敲除，第一次同源重组质粒从进入并整合到染色体上，第二次同源重组质粒与敲除引物扩增的基因从染色体上脱离，即基因敲除成功获得基因敲除菌。本发明获得的膜结合葡萄糖脱氢酶基因敲除菌能在甘油和葡萄糖混合培养基中生长良好，大大节约了醋酸杆菌培养成本，在生物催化剂应用领域具有重要意义。