公开(公告)号：CN114015672B

公开(公告)日：2022-05-31

申请号：CN202111511759.2

申请日：2021-12-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 朱升龙 ,  王振 ,  张靖伟 ,  叶贤龙 ,  陈永泉

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种Pfu DNA聚合酶，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示，经透析过的蛋白浓度为1.2mg/mL；编码该Pfu DNA聚合酶的基因的核苷酸序列如Seq ID No.2所示，将携带有该基因的表达载体转入宿主菌中构建获得表达菌株，经诱导表达获得所述Pfu DNA聚合酶。该Pfu DNA聚合酶可以无错配地扩增出6000bp以内的DNA片段，除了具有高保真性外还具有快速的延伸速度42bp/s和较高的变性温度100℃；37℃保存一周仍能保持较为完整的蛋白结构和优异的扩增效果，较野生型未修饰酶稳定性显著提高。因此，本发明Pfu DNA聚合酶在PCR反应中可以节省更多的时间，稳定性更强，增加了纯化后的回收效率。

公开(公告)号：CN113186174B

公开(公告)日：2022-04-15

申请号：CN202110441664.1

申请日：2021-04-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 朱升龙 ,  陈永泉 ,  张靖伟 ,  王振 ,  姜旋

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种Tn5突变酶的制备和应用，属于生物技术领域。对现有E54K，L372P突变的Tn5转座酶进行突变，显著提高片段化反应的效率。所述突变改变了Tn5转座酶的蛋白序列，以删减掉Tn5转座酶的冗余氨基酸序列，解决了原始Tn5标签化反应的效率低和偏好性问题。所述突变型Tn5转座酶可以更有效的提升反应效率，并且酶的稳定性有显著改善。

公开(公告)号：CN114015672A

公开(公告)日：2022-02-08

申请号：CN202111511759.2

申请日：2021-12-06

Applicant: 江南大学

Inventor： 朱升龙 ,  王振 ,  张靖伟 ,  叶贤龙 ,  陈永泉

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种Pfu DNA聚合酶，其氨基酸序列如Seq ID No.1所示，经透析过的蛋白浓度为1.2mg/mL；编码该Pfu DNA聚合酶的基因的核苷酸序列如Seq ID No.2所示，将携带有该基因的表达载体转入宿主菌中构建获得表达菌株，经诱导表达获得所述Pfu DNA聚合酶。该Pfu DNA聚合酶可以无错配地扩增出6000bp以内的DNA片段，除了具有高保真性外还具有快速的延伸速度42bp/s和较高的变性温度100℃；37℃保存一周仍能保持较为完整的蛋白结构和优异的扩增效果，较野生型未修饰酶稳定性显著提高。因此，本发明Pfu DNA聚合酶在PCR反应中可以节省更多的时间，稳定性更强，增加了纯化后的回收效率。

公开(公告)号：CN113186174A

公开(公告)日：2021-07-30

申请号：CN202110441664.1

申请日：2021-04-23

Applicant: 江南大学

Inventor： 朱升龙 ,  陈永泉 ,  张靖伟 ,  王振 ,  姜旋

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/10 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种Tn5突变酶的制备和应用，属于生物技术领域。对现有E54K，L372P突变的Tn5转座酶进行突变，显著提高片段化反应的效率。所述突变改变了Tn5转座酶的蛋白序列，以删减掉Tn5转座酶的冗余氨基酸序列，解决了原始Tn5标签化反应的效率低和偏好性问题。所述突变型Tn5转座酶可以更有效的提升反应效率，并且酶的稳定性有显著改善。