公开(公告)号：CN114763518B

公开(公告)日：2023-04-28

申请号：CN202111062175.1

申请日：2021-09-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  陈坚 ,  张永淋 ,  堵国成 ,  李江华 ,  王阳 ,  张腾 ,  王璟 ,  孟俊东 ,  汤传根

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/65 ,  C12N15/64 ,  C12N15/54 ,  C12N15/53 ,  C12N15/61 ,  C12P19/26 ,  C12R1/84 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了发酵生产肝素的酵母工程菌的构建及其应用，属于生物工程技术领域。本发明首先将肝素合成途径中的外源基因肝素前体合酶基因kfiC，α4‑N‑乙酰氨基葡糖转移酶酶基因kfiA和UDP‑葡萄糖脱氢酶编码基因tuaD分别整合到毕赤酵母和酿酒酵母基因组中，初步构建了肝素前体合成途径，之后分别在毕赤酵母和酿酒酵母中表达筛选并优化N‑脱乙酰磺酸转移酶、葡萄糖醛酸C5‑变构酶、磺酸乙酰肝素2‑磺酸转移酶、磺酸乙酰肝素6‑磺酸转移酶、磺酸乙酰肝素3‑磺酸转移酶，得到合成不同磺酸化程度的磺酸乙酰肝素的生产菌株。本发明首次实现了利用微生物发酵碳源合成不同磺酸化程度的肝素。