公开(公告)号：CN118109430A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202410214300.3

申请日：2024-02-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 杨套伟 ,  饶志明 ,  张笛 ,  张迪

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  C12P7/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及在4‑羟基‑2‑丁酮合成中的应用，属于酶工程技术领域。本发明以醇脱氢酶为基础，选择其第246位和第296位进行的氨基酸进行定点突变，将第246位谷氨酸突变为脯氨酸，第296位苏氨酸突变为脯氨酸。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，在60℃下孵育48h后其残余酶活为初始酶活的40.27％左右，约为野生型的5.75倍。与来自鼠李糖乳杆菌的NADH氧化酶突变型LrNoxL179S偶联合成4‑羟基‑2‑丁酮，配合底物流加策略最终4‑羟基‑2‑丁酮积累量为2.2g/L，为后续进行高效生物合成4‑羟基‑2‑丁酮及其衍生物生物的研究奠定了基础。