公开(公告)号：CN117305360B

公开(公告)日：2024-09-24

申请号：CN202311193188.1

申请日：2023-09-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 任泽民 ,  张夏一 ,  原佳琪 ,  俞晓毓 ,  杨婷婷 ,  李恒

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/87

Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物细胞核转染液及其制备方法，以及利用该细胞核转染液进行外源DNA和RNA的哺乳动物细胞核内递送的应用方法，该核转染液包括MgCl2、NaH2PO4、HEPEs、KCl以及DEPC处理水，利用该核转染液能够将DNA、RNA递送到多种哺乳动物细胞中，包括多种人以及小鼠的贴壁细胞和悬浮细胞等，而且能够获得非常高效的转染效率，同时核转后的细胞存活率高，更重要的是在常规方法难转染的悬浮细胞也获得了非常高的转染效率和细胞存活率。本发明采用常规、廉价的化学试剂配制得到该核转染液，成本低于其它常规转染试剂数百倍，操作简便，易于推广到包括基因编辑在内的遗传操作领域中的外源遗传物质细胞内的高效递送相关的基础研究以及临床应用中。

公开(公告)号：CN117305360A

公开(公告)日：2023-12-29

申请号：CN202311193188.1

申请日：2023-09-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 任泽民 ,  张夏一 ,  原佳琪 ,  俞晓毓 ,  杨婷婷 ,  李恒

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/87

Abstract: 本发明公开了一种哺乳动物细胞核转染液及其制备方法，以及利用该细胞核转染液进行外源DNA和RNA的哺乳动物细胞核内递送的应用方法，该核转染液包括MgCl2、NaH2PO4、HEPEs、KCl以及DEPC处理水，利用该核转染液能够将DNA、RNA递送到多种哺乳动物细胞中，包括多种人以及小鼠的贴壁细胞和悬浮细胞等，而且能够获得非常高效的转染效率，同时核转后的细胞存活率高，更重要的是在常规方法难转染的悬浮细胞也获得了非常高的转染效率和细胞存活率。本发明采用常规、廉价的化学试剂配制得到该核转染液，成本低于其它常规转染试剂数百倍，操作简便，易于推广到包括基因编辑在内的遗传操作领域中的外源遗传物质细胞内的高效递送相关的基础研究以及临床应用中。

公开(公告)号：CN118792327A

公开(公告)日：2024-10-18

申请号：CN202410847603.9

申请日：2024-06-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 任泽民 ,  张夏一 ,  杨婷婷 ,  李恒

IPC: C12N15/65 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种用于优化先导编辑效率的报告系统及其应用，所述系统包括报告基因细胞系和报告基因先导编辑系统；其中，所述报告基因细胞系为通过基因敲入技术将蓝色荧光蛋白(BFP)基因插入基因组的细胞系，所述报告基因先导编辑系统为将所述报告基因细胞中的BFP转变为绿色荧光蛋白(GFP)的先导编辑系统。本发明提供了一种基于高通量流式细胞术测定荧光蛋白转变的基因编辑报告体系，该体系可用来大规模的测试不同因素对先导编辑效率的影响，从而以此来发现影响先导编辑效率的影响因素，该系统能便捷、高效、高通量、直观地评价先导编辑的效率，实现对影响先导编辑效率关键因素的快速筛选，为先导编辑技术效率的优化提供了极大的便利。