公开(公告)号：CN114874966A

公开(公告)日：2022-08-09

申请号：CN202210677909.5

申请日：2022-06-15

Applicant: 江南大学

Inventor： 沐万孟 ,  张文立 ,  张嘉萌 ,  朱莺莺

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/56 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12N15/60 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高产3′‑唾液酸乳糖的大肠杆菌工程菌株的构建方法及应用，属于合成生物学和微生物代谢工程技术领域。本发明以甘油为碳源，乳糖为底物，通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除大肠杆菌中与底物降解以及中间产物分流相关的一系列基因，过表达glmM、glmU、glmS*，引入外源neuBCA途径，筛选新的α2,3‑SiaT并对其进行改造，鉴定和表征,进一步提高3′‑SL的产量。此外，还使得到的大肠杆菌工程菌株在5L发酵罐条件下分批补料38.5h可积累31.4g/L的3′‑SL，对于工业化生产3′‑SL具有重要意义。