公开(公告)号：CN119530190A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411829106.2

申请日：2024-12-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  孟伟伟 ,  魏婉清 ,  宋伟 ,  李晓敏 ,  胡贵鹏 ,  高聪 ,  闻建 ,  刘佳 ,  温碧莹

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组软骨素6‑O‑磺基转移酶突变体及其在合成硫酸软骨素C中的应用，属于生物工程技术领域。本发明的改造方法通过理性蛋白质工程设计出最佳突变体，对Δ106RnCHST3的蛋白质结构进行改造，克服了野生型Δ106RnCHST3的6‑O‑磺酸化天然活性低都问题，得到最佳突变体Δ106RnCHST3F210R/Y310F/A209L/A303S/I173L成功实现24h磺酸化率可达46％，相比野生型提升3倍，加快了生物酶制备CSC的工业化。

公开(公告)号：CN119331849A

公开(公告)日：2025-01-21

申请号：CN202411627046.6

申请日：2024-11-14

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  孟伟伟 ,  魏婉清 ,  宋伟 ,  李晓敏 ,  胡贵鹏 ,  高聪 ,  闻建 ,  刘佳

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组软骨素6‑O‑磺基转移酶截断体及其在合成硫酸软骨素C中的应用，属于生物工程技术领域。在来源于挪威大鼠的软骨素6‑O‑磺基转移酶的基础上，在RnCHST3的N端截断前11～106个氨基酸得到软骨素6‑O‑磺基转移酶截断体，表现出比原始RnCHST3更高的磺酸化率，提升了51％，24h磺酸化率可达11.5％。本发明在Δ106RnCHST3基础上，构建MBP融合表达的pET28a(+)‑MBP_Δ106RnCHST3，其可溶表达量得到显著提升。本发明还将所述软骨素6‑O‑磺基转移酶截断体用于催化制备CSC，提供了绿色环保的新方法。