一种表达α-L-鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN110066760B

    公开(公告)日:2020-12-29

    申请号:CN201910435031.2

    申请日:2019-05-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达α‑L‑鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用,属于基因工程技术与生物医药领域。将编码序列为SEQ ID NO.2所述序列在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达,用0.5μmol/L IPTG进行诱导并获得活力为5.6U/L的重组鼠李糖苷水解酶。该重组酶具有特异性水解芦丁、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷以及朝藿定C鼠李糖苷的活性。重组酶添加量为460U/L时,90min内完全催化水解1g/L的朝藿定C生成唯一产物淫羊藿苷。

    一种表达α-L-鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN110066760A

    公开(公告)日:2019-07-30

    申请号:CN201910435031.2

    申请日:2019-05-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达α-L-鼠李糖苷酶的重组大肠杆菌及其应用,属于基因工程技术与生物医药领域。将编码序列为SEQ ID NO.2所述序列在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达,用0.5μmol/L IPTG进行诱导并获得活力为5.6U/L的重组鼠李糖苷水解酶。该重组酶具有特异性水解芦丁、橙皮苷、柚皮苷、新橙皮苷以及朝藿定C鼠李糖苷的活性。重组酶添加量为460U/L时,90min内完全催化水解1g/L的朝藿定C生成唯一产物淫羊藿苷。

    一种高通量检测柚皮素的方法

    公开(公告)号:CN109580604A

    公开(公告)日:2019-04-05

    申请号:CN201811469336.7

    申请日:2018-11-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高通量检测柚皮素的方法。属于合成生物技术领域。本发明使用的显色剂为氢氧化钠或者氢氧化钾。经处理后,柚皮素呈现黄色,浓度越高,黄色越深,且显色越快,一般5min内反应完毕。即便在干扰物质对香豆酸存在时也可以直接用目视法选择高产菌株。该反应液也可以使用酶标仪做进一步检测。在对香豆酸存在时,建议使用KOH处理,此时柚皮素的最佳检测波长为410-430nm。该方法简便高效,抗干扰,精准度高,成本低廉,适用于高通量筛选柚皮素高产菌株。

    一种高通量检测圣草酚的方法

    公开(公告)号:CN109342415A

    公开(公告)日:2019-02-15

    申请号:CN201811435786.4

    申请日:2018-11-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高通量检测圣草酚的方法,属于合成生物技术领域。本发明使用的显色剂为氢氧化钠或者氢氧化钾,经显色处理后,圣草酚呈现紫色,浓度越高,紫色越深,且显色越快,静置时间越长,颜色也会加深,一般5min内反应完毕,即便在干扰物质柚皮素存在时依然可以直接用目视法选择高产菌株。该反应液也可以使用酶标仪做进一步检测。在水溶液中,建议使用NaOH处理,最佳检测波长为550-580nm,在无色的合成培养基中建议使用KOH处理,最佳检测波长为560-570nm。该方法简便高效,抗干扰,精准度高,时间和人力成本低,适用于高通量筛选圣草酚高产菌株。

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