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公开(公告)号:CN1273196C
公开(公告)日:2006-09-06
申请号:CN200410013317.5
申请日:2004-06-18
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向融合防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌Escherichia coli JM109/pGJA-P/VAX,CCTCC NO:M204028。用限制性酶NheI和NotI酶切处理靶向融合防龋真核表达质粒pGJA-P切下靶向融合基因(包括CTLA-4-Ig目的基因、GLU、A-P片段),将靶向融合基因克隆到pVAX1载体中,酶切证实构建的正确性,并命名为pGJA-P/VAX,转染真核细胞CHO细胞系,证实可以在真核细胞正确表达重组蛋白。本发明方法简单,安全性高,避免产生对氨卞青霉素的过敏反应,生产成本低廉,可大幅度提高其免疫效能。
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公开(公告)号:CN1593663A
公开(公告)日:2005-03-16
申请号:CN200410013318.X
申请日:2004-06-18
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌Escherichia coli JM109/pGJGLU/VAX,CCTCC No:M204027。用限制性酶NheI和NotI酶切处理靶向防龋真核表达质粒pGJGLU切下靶向融合基因(包括CTLA-4-Ig目的基因和GLU片段),将靶向融合基因克隆到pVAX1载体中,酶切证实构建的正确性,并命名为pGJGLU/VAX,转染真核细胞CHO细胞系,证实可以在真核细胞正确表达重组蛋白。本发明方法简单,安全性高,生产成本低廉,免疫应答持久,可大幅度提高其免疫效能。
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公开(公告)号:CN1419938A
公开(公告)日:2003-05-28
申请号:CN01133697.8
申请日:2001-11-21
Applicant: 武汉大学
IPC: A61K39/108 , A61K48/00 , A61P1/02
CPC classification number: Y02A50/474
Abstract: 本发明公开了一种融合防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌(Esherichiacoli)JM109/pGLUA-P CCTCC NO:M201042。采用PCR方法,从携带有变形链球菌GS-5株葡糖基转移酶GTF-I的基因gtfB的质粒pYNB13中扩增出编码葡聚糖结合区的序列GLU,并克隆到真核载体pCI中,构建出真核表达质粒pGLU。经DNA序列测定,证实其插入序列的正确性。再将pCIA-P质粒中的变形链球菌表面蛋白PAc的A区和P区的A-P片段序列与pGLU质粒连接,构建出GTF-PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。本发明方法简单,安全性高,生产成本低廉,免疫应答持久,有效防龋。
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公开(公告)号:CN100462104C
公开(公告)日:2009-02-18
申请号:CN02139118.1
申请日:2002-09-29
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向融合防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌(Esherichia coli)JM109/pGJA-P CCTCC NO:M202037。采用PCR方法,从人外周淋巴细胞中扩增出编码细胞毒性T淋巴细胞抗原4信号肽、胞外区的序列和Igγ1铰链区、恒定区基因,并分别克隆到pUCm-T载体中,构建出pGCTLA和pJIg。再将pJIg质粒中的Igγ1铰链区、恒定区基因序列与pGCTLA粒连接,构建出编码细胞毒性T淋巴细胞抗原4信号肽、胞外区的序列和Igγ1铰链区、恒定区融合基因的重组质粒pGJ。酶切鉴定插入片段的正确性,然后将融合基因插入pGLUA-P的前端,获得靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P。本发明方法简单,安全性高,生产成本低廉,可大幅度提高其免疫效能。
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公开(公告)号:CN1284604C
公开(公告)日:2006-11-15
申请号:CN200410013318.X
申请日:2004-06-18
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌Escherichiacoli JM109/pGJGLU/VAX,CCTCC NO:M204027。用限制性酶NheI和NotI酶切处理靶向防龋真核表达质粒pGJGLU切下靶向融合基因(包括CTLA-4-Ig目的基因和GLU片段),将靶向融合基因克隆到pVAX1载体中,酶切证实构建的正确性,并命名为pGJGLU/VAX,转染真核细胞CHO细胞系,证实可以在真核细胞正确表达重组蛋白。本发明方法简单,安全性高,生产成本低廉,免疫应答持久,可大幅度提高其免疫效能。
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公开(公告)号:CN1593662A
公开(公告)日:2005-03-16
申请号:CN200410013317.5
申请日:2004-06-18
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种靶向融合防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌Escherichia coli JM109/pGJA-P/VAX,CCTCC No:M204028。用限制性酶NheI和NotI酶切处理靶向融合防龋真核表达质粒pGJA-P切下靶向融合基因(包括CTLA-4-Ig目的基因、GLU、A-P片段),将靶向融合基因克隆到pVAX1载体中,酶切证实构建的正确性,并命名为pGJA-P/VAX,转染真核细胞CHO细胞系,证实可以在真核细胞正确表达重组蛋白。本发明方法简单,安全性高,避免产生对氨卞青霉素的过敏反应,生产成本低廉,可大幅度提高其免疫效能。
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公开(公告)号:CN1160125C
公开(公告)日:2004-08-04
申请号:CN01133696.X
申请日:2001-11-21
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种免疫防龋DNA疫苗及制备方法和应用,大肠杆菌(Escherichia coli)CCTCC NO:M201041。采用PCR技术从携带有PAc编码基因pac的质粒pPC41扩增出重要抗原决定簇区A区和P区片段,并克隆到pGEM-T载体中,将筛选后的阳性重组质粒与真核表达质粒pCI定向克隆成防龋DNA疫苗pCIA-P,并经DNA序列分析鉴定证实构建的正确性,动物实验证明可有效防龋。本发明方法简单,生产成本低廉,安全性高,免疫应答持久,该疫苗在鼻粘膜、胃肠道粘膜中的应用,还可用于龋病易感人群的龋病防治。
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公开(公告)号:CN104940920A
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201510324275.5
申请日:2015-06-12
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种防龋齿蛋白疫苗及其规模化制备方法。本发明提供的防龋齿蛋白疫苗,其活性成分为SEQ ID NO:1所示的蛋白质。其制备方法包括如下步骤:1)通过PCR方法,从变形链球菌UA159基因组扩增水不溶性葡萄糖基转移酶葡萄糖结合区Glu基因片段;2)将所述GLU基因片段构建到含有6-His组氨酸标签的表达载体上,得到重组质粒,转化至表达菌,酶切鉴定;3)诱导表达可溶性的重组蛋白;4)纯化重组蛋白。该方法适用于大规模制备人用防龋蛋白疫苗,具有可溶性表达,安全高效,具有良好的开发和应用前景。
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公开(公告)号:CN1490054A
公开(公告)日:2004-04-21
申请号:CN02139123.8
申请日:2002-09-30
Applicant: 武汉大学
IPC: A61K45/00 , A61K31/7088 , A61P1/02
CPC classification number: Y02A50/473
Abstract: 本发明公开了一种靶向防龋DNA疫苗及制备方法,大肠杆菌(Esherichia coli)JM109/pGJGLU CCTCC NO:M202036。设计一对适配子,将靶向融合防龋DNA疫苗pGJA-P用SalI和NotI限制性内切酶进行双酶切,切除A-P片段,在T4连接酶的作用下进行连接反应,构建出编码细胞毒性T淋巴细胞抗原4信号肽、胞外区的序列和Igγ1铰链区、恒定区融合基因与变形链球菌葡糖基转移酶的GLU区序列的具有靶向功能的防龋DNA疫苗pGJGLU。本发明方法简单,安全性高,生产成本低廉,免疫应答持久,可大幅度提高其免疫效能。
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公开(公告)号:CN1142434C
公开(公告)日:2004-03-17
申请号:CN02115527.5
申请日:2002-02-05
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种诊断口腔疾病的试剂,选用孟加拉红为染色剂,其与肿瘤细胞DNA多聚酶有亲和力,其着色对口腔癌的诊断有特异性,其着色深浅度能鉴别口腔癌和癌前损害,制备出孟加拉红口腔癌诊断试剂由以下原料构成:碳酸氢钠、甲醛或乙醇、孟加拉红、蒸馏水,均按一定比例配制。本发明工艺简单,配伍合理,安全无毒,操作简便,提高疾病检诊断率和病检阳性率,并可供患者自我识别病情,有助于临床对口腔癌的早期诊断。
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