一种紧凑型编辑工具EbCas12a在基因编辑中的应用

    公开(公告)号:CN115786305A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211369291.2

    申请日:2022-11-03

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种紧凑型编辑工具EbCas12a在基因编辑中的应用,属于生物医学领域。所述EbCas12a的氨基酸序列如SED ID NO.1或2所示。本发明首次在Erysipelotrichia bacterium菌株中鉴定出具有基因编辑效应的II类V型更小的CRISPR蛋白EbCas12a(1158AA),比目前报道的具有基因编辑功能的Cas12a均要小;所述EbCas12a能够在crRNA的介导下定点对体外DNA和真核生物基因组进行基因编辑。EbCas12a的发现进一步扩大了基因编辑工具的种类,对基础科研和临床治疗具有十分重要的作用。

    一种人牙周炎牙龈组织单细胞悬液的制备方法

    公开(公告)号:CN115074316A

    公开(公告)日:2022-09-20

    申请号:CN202210762322.4

    申请日:2022-06-29

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种人牙周炎牙龈组织单细胞悬液的制备方法,所述方法包括:将人类牙周炎炎症牙龈组织冲洗、剪碎、离心去上清,获得组织沉淀;将所述组织沉淀采用I型胶原酶和Dispase II进行酶解消化,后终止消化并采用过滤网过滤收集滤液,经离心,获得第一细胞沉淀;向所述第一细胞沉淀中加入红细胞裂解液,静置后离心去除上清,清洗后离心,获得第二细胞沉淀;向所述第二细胞沉淀中加入死细胞去除磁珠进行孵育,获得含磁珠细胞悬液;将所述含磁珠细胞悬液置于磁柱过滤,后收集滤液经离心获得第三细胞沉淀并重悬,获得牙龈组织单细胞悬液。该方法无需专业化设备和技能,耗时短即可获得大量的高活性单细胞悬液。

    一种Cas12a变体及其在基因编辑中的应用

    公开(公告)号:CN113136376A

    公开(公告)日:2021-07-20

    申请号:CN202110578385.X

    申请日:2021-05-26

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明提供了一种Cas12a变体及其在基因编辑中的应用,所述Cas12a变体包括如下中的至少一种:Lb2Cas12a‑K518R,氨基酸序列分别如SED ID NO.1所示;LbCas12a‑K538R,氨基酸序列分别如SED ID NO.2所示;AsCas12a‑K548R,氨基酸序列分别如SED ID NO.3所示。本发明首次通过蛋白改造,获得Cas12a变体,使Cas12a的PAM识别相比较对应野生型更严格,从而降低脱靶效应;所述三种Cas12a变体能够在crRNA的介导下定点对真核生物基因组进行基因编辑且具有更低的脱靶效应,三种Cas12a变体的发现进一步扩大了基因编辑工具的种类。

    与绝经后骨质疏松相关的miRNA标志物和试剂盒

    公开(公告)号:CN107419022A

    公开(公告)日:2017-12-01

    申请号:CN201710708188.9

    申请日:2017-08-17

    Applicant: 武汉大学

    Inventor: 刘欢 林楚娇 陈智

    Abstract: 本发明提供了一种与绝经后骨质疏松相关的miRNA标志物和试剂盒,具体涉及miR-338簇在作为绝经后骨质疏松标志物中的应用。本发明发现miR-338簇如miR-338-3p和/或miR-3065-5p在绝经后骨质疏松病人中的高表达,可作为绝经后骨质疏松病的标志物,用于制备针对绝经后骨质疏松病辅助诊断试剂盒,可以特异地检测组织中miR-338簇的表达量,及早且有效地用于临床绝经后骨质疏松病的早期辅助诊断,且无创。另外,miR-338簇的抑制剂有促进成骨类的功效,有效地治疗或预防绝经后骨质疏松。

    诱导可逆性永生化前成牙本质细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN102516396A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110436454.X

    申请日:2011-12-23

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了诱导可逆性永生化前成牙本质细胞系及其建立方法。本发明细胞系是其引入了致永生化基因,在该基因的两端具有LoxP序列,同时该细胞系还表达Cre酶与雌激素受体蛋白的融合蛋白。这种融合蛋白由于体积过大无法进入细胞核,因此在正常情况下这种蛋白无法将基因组内的LoxP位点间的敲除。而当细胞接受一定浓度的4-OH-Tomaxifen刺激后,Cre两端的雌激素受体将脱落,Cre得以进入细胞核从而将去除基因组内的永生化基因编码序列,达到去永生化的目的。本发明为进一步研究成牙本质细胞生物学特性提供了理想的体外模型,同时也为牙本质再生修复和牙本质发育相关疾病机制研究提供理想的材料。

    一种人牙周炎牙龈组织单细胞悬液的制备方法

    公开(公告)号:CN115074316B

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202210762322.4

    申请日:2022-06-29

    Applicant: 武汉大学

    Abstract: 本发明公开了一种人牙周炎牙龈组织单细胞悬液的制备方法,所述方法包括:将人类牙周炎炎症牙龈组织冲洗、剪碎、离心去上清,获得组织沉淀;将所述组织沉淀采用I型胶原酶和Dispase II进行酶解消化,后终止消化并采用过滤网过滤收集滤液,经离心,获得第一细胞沉淀;向所述第一细胞沉淀中加入红细胞裂解液,静置后离心去除上清,清洗后离心,获得第二细胞沉淀;向所述第二细胞沉淀中加入死细胞去除磁珠进行孵育,获得含磁珠细胞悬液;将所述含磁珠细胞悬液置于磁柱过滤,后收集滤液经离心获得第三细胞沉淀并重悬,获得牙龈组织单细胞悬液。该方法无需专业化设备和技能,耗时短即可获得大量的高活性单细胞悬液。

Patent Agency Ranking