公开(公告)号：CN112689679A

公开(公告)日：2021-04-20

申请号：CN202080005050.2

申请日：2020-07-22

Applicant: 株式会社东芝 ,  国立大学法人信州大学

Inventor： 赤星英一 ,  石原美津子 ,  中泽洋三 ,  盛田大介

IPC: C12N15/88 ,  C12N5/10 ,  C12N15/54

Abstract: 根据一个实施方案，提供了一种产生表达嵌合抗原受体(CAR)的基因修饰T细胞(CAR‑T细胞)的方法。所述方法包括用激活T细胞的抗体刺激包含T细胞的细胞群，使该细胞群与核酸引入载体接触，以及在接触后培养所述细胞群，其中所述核酸引入载体包含脂质颗粒、包封在脂质颗粒中的包含CAR基因的第一核酸和包含转座酶基因的第二核酸。

公开(公告)号：CN108138171B

公开(公告)日：2022-05-13

申请号：CN201680058705.6

申请日：2016-10-07

Applicant: 国立大学法人名古屋大学 ,  国立大学法人信州大学

Inventor： 西尾信博 ,  中沢洋三 ,  田中美幸 ,  盛田大介 ,  高桥义行

IPC: C12N15/09 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00 ,  C07K14/705 ,  C07K19/00 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明实现利用转座子法的CAR疗法的基因导入效率的提高。本发明提供一种表达嵌合抗原受体的基因修饰T细胞的制备方法，包括以下的步骤：(1)准备非增殖性细胞的步骤，所述非增殖性细胞是通过在利用抗CD3抗体和抗CD28抗体对含有T细胞的细胞群进行刺激后，进行使增殖能力丧失的处理而得到的；(2)通过转座子法得到导入有靶抗原特异性嵌合抗原受体基因的基因修饰T细胞的步骤；(3)将步骤(1)中准备的非增殖性细胞和步骤(2)中得到的基因修饰T细胞混合，在利用抗CD3抗体和抗CD28抗体进行刺激的同时进行共培养的步骤；(4)回收培养后的细胞的步骤。另外，本发明提供一种表达嵌合抗原受体的基因修饰T细胞的制备方法，包括以下的步骤：(i)准备保持有病毒肽抗原的非增殖性细胞的步骤，所述保持有病毒肽抗原的非增殖性细胞是通过在利用抗CD3抗体和抗CD28抗体对含有T细胞的细胞群进行刺激后，进行病毒肽抗原存在下的培养和使增殖能力丧失的处理而得到的；(ii)通过转座子法得到导入有靶抗原特异性嵌合抗原受体基因的基因修饰T细胞的步骤；(iii)将步骤(i)中准备的非增殖性细胞和步骤(ii)中得到的基因修饰T细胞混合，共培养的步骤；(iv)回收培养后的细胞的步骤。

公开(公告)号：CN108138171A

公开(公告)日：2018-06-08

申请号：CN201680058705.6

申请日：2016-10-07

Applicant: 国立大学法人名古屋大学 ,  国立大学法人信州大学

Inventor： 西尾信博 ,  中沢洋三 ,  田中美幸 ,  盛田大介 ,  高桥义行

IPC: C12N15/09 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00 ,  C07K14/705 ,  C07K19/00 ,  C12N5/10

CPC classification number: A61K35/17 ,  C07K14/705 ,  C07K19/00 ,  C12N5/10 ,  C12N15/09

Abstract: 本发明实现利用转座子法的CAR疗法的基因导入效率的提高。本发明提供一种表达嵌合抗原受体的基因修饰T细胞的制备方法，包括以下的步骤：(1)准备非增殖性细胞的步骤，所述非增殖性细胞是通过在利用抗CD3抗体和抗CD28抗体对含有T细胞的细胞群进行刺激后，进行使增殖能力丧失的处理而得到的；(2)通过转座子法得到导入有靶抗原特异性嵌合抗原受体基因的基因修饰T细胞的步骤；(3)将步骤(1)中准备的非增殖性细胞和步骤(2)中得到的基因修饰T细胞混合，在利用抗CD3抗体和抗CD28抗体进行刺激的同时进行共培养的步骤；(4)回收培养后的细胞的步骤。另外，本发明提供一种表达嵌合抗原受体的基因修饰T细胞的制备方法，包括以下的步骤：(i)准备保持有病毒肽抗原的非增殖性细胞的步骤，所述保持有病毒肽抗原的非增殖性细胞是通过在利用抗CD3抗体和抗CD28抗体对含有T细胞的细胞群进行刺激后，进行病毒肽抗原存在下的培养和使增殖能力丧失的处理而得到的；(ii)通过转座子法得到导入有靶抗原特异性嵌合抗原受体基因的基因修饰T细胞的步骤；(iii)将步骤(i)中准备的非增殖性细胞和步骤(ii)中得到的基因修饰T细胞混合，共培养的步骤；(iv)回收培养后的细胞的步骤。