公开(公告)号：CN103145851A

公开(公告)日：2013-06-12

申请号：CN201310057657.7

申请日：2013-02-22

Applicant: 暨南大学

Inventor： 洪岸 ,  吴陆生 ,  陈小佳

IPC: C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/18 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  A61K38/17 ,  A61K47/48 ,  A61P27/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组蛋白PACAP38-NtA及其编码基因与应用。该重组蛋白PACAP38-NtA的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码该重组蛋白PACAP38-NtA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列克隆至原核表达载体pET-3c中，转染到大肠杆菌BL21(DE3)中，得到表达重组蛋白PACAP38-NtA的菌株。本发明使用小型生物反应器发酵该菌株，使用常用的离子交换层析和镍柱亲和层析两步纯化法，操作简单，能获得高纯度的目的蛋白。获得的重组PACAP38-NtA融合蛋白能与层粘连蛋白特异性结合，能有效的促进神经元样细胞PC12进行增殖和分化，作用于小鼠角膜刮伤部位，能提高损伤部位的修复能力，可用于制备角膜损伤修复的药品。

公开(公告)号：CN103145851B

公开(公告)日：2014-07-02

申请号：CN201310057657.7

申请日：2013-02-22

Applicant: 暨南大学

Inventor： 洪岸 ,  吴陆生 ,  陈小佳

IPC: C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/18 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P21/02 ,  A61K38/17 ,  A61K47/48 ,  A61P27/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组蛋白PACAP38-NtA及其编码基因与应用。该重组蛋白PACAP38-NtA的氨基酸序列如SEQ？ID？NO.1所示。编码该重组蛋白PACAP38-NtA的核苷酸序列如SEQ？ID？NO.2所示。将如SEQ？ID？NO.2所示的核苷酸序列克隆至原核表达载体pET-3c中，转染到大肠杆菌BL21(DE3)中，得到表达重组蛋白PACAP38-NtA的菌株。本发明使用小型生物反应器发酵该菌株，使用常用的离子交换层析和镍柱亲和层析两步纯化法，操作简单，能获得高纯度的目的蛋白。获得的重组PACAP38-NtA融合蛋白能与层粘连蛋白特异性结合，能有效的促进神经元样细胞PC12进行增殖和分化，作用于小鼠角膜刮伤部位，能提高损伤部位的修复能力，可用于制备角膜损伤修复的药品。