公开(公告)号：CN115873888A

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN202111133853.9

申请日：2021-09-27

Applicant: 普莱柯生物工程股份有限公司

Inventor： 田克恭 ,  李鹏昊 ,  黄玉欣 ,  肖燕 ,  张许科

IPC: C12N15/81 ,  C07K14/435 ,  A61K39/00 ,  A61K39/39 ,  A61K9/00 ,  A61K9/08 ,  A61K9/10 ,  A61K9/19 ,  A61P33/10

Abstract: 本发明通过两次转化，利用抗性基因浓度梯度筛选重组了最优拷贝数的EG95蛋白片段基因的GS115酵母转化子，并通过westernblotting筛选出高表达量的GS115酵母转化子，能高表达量表达EG95蛋白片段。其制备的EG95抗原蛋白基因工程亚单位疫苗免疫效果良好，低蛋白抗原含量时即可保护牛、羊免受棘球蚴虫的感染。

公开(公告)号：CN115403673A

公开(公告)日：2022-11-29

申请号：CN202110592016.6

申请日：2021-05-28

Applicant: 普莱柯生物工程股份有限公司

Inventor： 田克恭 ,  李鹏昊 ,  张许科

IPC: C07K19/00 ,  A61K39/235 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明涉及禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原，该亚单位纳米颗粒抗原由禽减蛋综合征病毒Knob‑HPF融合蛋白自我组装而成；该Knob‑HPF融合蛋白的蛋白序列从N端到C端依次由禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白的Knob区、linker以及幽门螺杆菌Ferritin(HPF)的N端片段组成；该禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白的Knob区为SEQ ID NO:1或其简并序列所编码。该亚单位纳米颗粒抗原呈二十四聚体的球形纳米颗粒，抗原滴度高，制备的疫苗具有良好的免疫保护作用。

公开(公告)号：CN113265365B

公开(公告)日：2023-10-17

申请号：CN202010096475.0

申请日：2020-02-17

Applicant: 普莱柯生物工程股份有限公司

Inventor： 田克恭 ,  李鹏昊 ,  张许科

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61K39/245 ,  A61K39/235 ,  A61K39/23 ,  A61K39/39 ,  A61K39/00 ,  A61K45/06 ,  A61P33/12 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种高效表达外源蛋白的大肠杆菌构建方法及其应用，其中，所述方法包括：步骤(1)BL21(DE3)lpxM基因的敲除；步骤(2)将tig基因插入步骤(1)得到的BL21(DE3)lpxM基因缺失株；(3)重组载体pET28a‑Rcodon的构建；(4)外源蛋白基因克隆至步骤(3)得到的重组载体pET28a‑Rcodon；(5)将步骤(4)所得重组载体转化步骤(2)得到的菌株；以及步骤(6)外源蛋白的收获。本发明方法使得外源蛋白高效表达，能较大肠杆菌常规表达显著提高外源蛋白的表达量，内毒素含量大大降低，且本发明方法可应用到多种外源蛋白的高效表达，可广泛适用于真核生物来源的蛋白在内的多种兽医疫苗蛋白，具有广泛的适用范围。

公开(公告)号：CN114854719A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202110158488.0

申请日：2021-02-04

Applicant: 普莱柯生物工程股份有限公司

Inventor： 田克恭 ,  李鹏昊 ,  张许科

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/81 ,  C07K1/14 ,  C07K14/01 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供一种制备高效核酸酶的方法，该方法包括：克隆重组如SEQ ID No.1或者SEQ ID No.2所示的高效核酸酶基因到载体，将该重组载体转化至酵母细胞，筛选基因组中重组该基因的酵母细胞，对该重组酵母细胞进行诱导表达，分离纯化高效核酸酶。本发明的制备方法实现了在产业上高效的表达高效核酸酶，其表达的N段截短的高效核酸酶具有更好的酶活性，能广泛应用于亚单位疫苗中抗原蛋白的制备。

公开(公告)号：CN113265365A

公开(公告)日：2021-08-17

申请号：CN202010096475.0

申请日：2020-02-17

Applicant: 普莱柯生物工程股份有限公司

Inventor： 田克恭 ,  李鹏昊 ,  张许科

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  A61K39/12 ,  A61K39/245 ,  A61K39/235 ,  A61K39/23 ,  A61K39/39 ,  A61K39/00 ,  A61K45/06 ,  A61P33/12 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种高效表达外源蛋白的大肠杆菌构建方法及其应用，其中，所述方法包括：步骤(1)BL21(DE3)lpxM基因的敲除；步骤(2)将tig基因插入步骤(1)得到的BL21(DE3)lpxM基因缺失株；(3)重组载体pET28a‑Rcodon的构建；(4)外源蛋白基因克隆至步骤(3)得到的重组载体pET28a‑Rcodon；(5)将步骤(4)所得重组载体转化步骤(2)得到的菌株；以及步骤(6)外源蛋白的收获。本发明方法使得外源蛋白高效表达，能较大肠杆菌常规表达显著提高外源蛋白的表达量，内毒素含量大大降低，且本发明方法可应用到多种外源蛋白的高效表达，可广泛适用于真核生物来源的蛋白在内的多种兽医疫苗蛋白，具有广泛的适用范围。