公开(公告)号：CN109321666A

公开(公告)日：2019-02-12

申请号：CN201811039260.4

申请日：2018-09-06

Applicant: 新疆农业科学院农业质量标准与检测技术研究所

Inventor： 赵艳坤 ,  陈贺 ,  刘慧敏 ,  蔡建星 ,  李进 ,  王成

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/10 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明涉及乳样中致病菌检测技术技术领域，是一种SDS-PMA-qPCR法检测乳中无乳链球菌活菌的方法，其按下述步骤进行：第一步，待测乳样SDS-PMA处理，第二步，DNA提取，第三步，qPCR扩增反应，第四步，结果测定。本发明方法在提取DNA之前，能够更好地提取DNA，提高本检测方法的灵敏性，在用PMA处理菌体之前，使用SDS能增强PMA对菌体的渗透性，并且合适的SDS浓度能够有效促进PMA对死菌的渗透效果，二者结合能够精确区分无乳链球菌活细胞和死细胞，总之，本发明方法不受待测乳样中无乳链球菌死菌的干扰，能够准确检测出并定量乳中无乳链球菌的具体含菌量，并且特异性高，可以避免假阳性结果。