细粒棘球绦虫EgM123蛋白单克隆抗体的制备方法

    公开(公告)号:CN117069834A

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN202210986179.7

    申请日:2022-08-17

    Inventor: 翟少华

    Abstract: 本发明公开了细粒棘球绦虫EgM123蛋白单克隆抗体的制备方法,涉及生物工程技术领域,包括:构建EgM123基因原核表达载体:pET28a‑EgM123,通过双酶切与基因测序验证,构建成功质粒转化BL21感受态细胞,I PTG诱导pET28a‑EgM123基因表达,SDS‑PAGE电泳分析蛋白大小及表达,并优化出最佳表达条件,将复性浓缩后的蛋白使用Western b l ot和ELI SA检测其反应原性,为制备EgM123蛋白单克隆抗体提供免疫蛋白。本发明制备的EgM123蛋白单克隆抗体可直接用于检测感染动物脏器组织抗原定位,节省检测诊断时间,实现高效定性诊断;同时,也可用于犬粪便虫体抗原的检测,实现对细粒棘球绦虫感染犬更为高效、便捷的诊断,利于对包虫病的净化,实现从感染源头到易感群体形成综合性的防控体系。

    基于代谢组学的包虫病早期诊断标志物的筛选方法及应用

    公开(公告)号:CN116413427A

    公开(公告)日:2023-07-11

    申请号:CN202310357550.8

    申请日:2023-04-06

    Abstract: 本发明公开了基于代谢组学的包虫病早期诊断标志物的筛选方法及应用,涉及生物医学技术领域,其技术方案要点是:本发明利用代谢组学检测方法,成功筛选出“原头蚴体外培养物‑肝脏包囊液‑阳性血清”三者之间所共有的差异代谢标志物N‑棕榈酰牛磺酸、3‑羟基瑞格列奈或酮亮氨酸,进一步对体外不同数量原头蚴培养液、大鼠不同时期感染模型血液样本、牛羊临床阳性血清中的代谢物质进行精准定量分析,以确定代谢标志物在感染不同情况下浓度的动态变化,进而实现动态、真实表现感染动物体内原头蚴对机体脏器的损伤程度、以及感染周期,为建立高灵敏度的早期诊断方法,为临床基层包虫病的特异性诊断和早期诊断筛查提供技术方法。

    细粒棘球绦虫EgM123基因重组狂犬病病毒SRV9株的构建方法

    公开(公告)号:CN116574697A

    公开(公告)日:2023-08-11

    申请号:CN202310051173.5

    申请日:2023-02-02

    Inventor: 翟少华

    Abstract: 本发明公开了细粒棘球绦虫EgM123基因重组狂犬病病毒SRV9株的构建方法,涉及重组狂犬病病毒技术领域,其技术要点为:采用病毒反向遗传学技术,构建狂犬病病毒SRV9的结构蛋白N、P、L基因、N‑P‑M基因融合片段、G+EgM123+eGFP基因融合片段重组于pcDNA3.1(‑)表达载体上,构建EgM123基因重组狂犬病SRV9病毒全长cDNA;将构建成的SRV9+EgM123全长cDNA重组质粒与辅助质粒pcDNA3.1‑N、P、L共同转染表达RNA聚合酶的BSR细胞,拯救出EgM123基因重组狂犬病病毒,并对重组病毒的滴度、形态和免疫原性进行测定。本发明的方法能够为研制“狂犬病和包虫病二联基因重组疫苗”提供疫苗毒株。

    一种蜱虫样品扫描电镜固定配方及方法

    公开(公告)号:CN105486554A

    公开(公告)日:2016-04-13

    申请号:CN201510800641.X

    申请日:2015-11-19

    CPC classification number: G01N1/28

    Abstract: 本发明属于寄生虫扫描电镜样品固定方法技术领域,涉及一种蜱虫样品扫描电镜固定配方及方法,该固定配方由PBS缓冲溶液、聚山梨酯及戊二醛制作成戊二醛固定液。方法包括步骤(一)观察蜱虫样品假头基内是否有残留的宿主组织,若有则去除;(二)清洗蜱虫样品体表;(三)用戊二醛固定液在室温下进行蜱虫样品固定;(四)固定后的蜱虫样品,进行乙醇的梯度脱水;(五)将蜱虫样品放入无水乙醇与丙酮的混合液中进行置换;最后放入丙酮进行置换;(六)将蜱虫样品放入真空冷冻干燥仪进行干燥,将获得的蜱虫样品进行喷金。扫描电镜观察时样品不会因电子束轰击后产生水蒸气遭遇高能电子流电离而放电,出现图像模糊、雾状,或者根本不能成像的现象。

Patent Agency Ranking