新疆野扁桃TP-M13-SSR核心引物及其应用

    公开(公告)号:CN105969902B

    公开(公告)日:2019-10-11

    申请号:CN201610600667.4

    申请日:2016-07-27

    Abstract: 本发明涉及一种新疆野扁桃TP‑M13‑SSR核心引物及其应用,该引物具有扩增稳定、电泳条带清晰、多态性丰富的优点,利用在TP‑M13‑SSR扩增产物检测过程中的一种基于荧光测序技术的高通量低成本分析技术体系,本发明公开了新疆野扁桃TP‑M13‑SSR引物,它包括12对引物,本发明筛选出的12对TP‑M13‑SSR核心引物在新疆野扁桃基因组中分布均匀,带型清晰容易判读,同时适合普通变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测平台和毛细管荧光检测平台检测;多态性高;扩增重复性好,可完全适用于新疆野扁桃遗传多样性分析、品种鉴定以及聚类分析等方面的研究。

    一种基于SSR分子标记鉴别扁桃属植物种质的方法

    公开(公告)号:CN105512513A

    公开(公告)日:2016-04-20

    申请号:CN201510870315.6

    申请日:2015-12-02

    Abstract: 本发明涉及一种基于SSR分子标记鉴别扁桃属植物种质的方法,该方法通过选择多态性高的SSR引物,对55份扁桃属植物种质材料进行SSR-PCR扩增反应、电泳检测、统计分析。结果表明:使用筛选自核果类的100对SSR引物中的10对多态性强的引物,对扁桃属植物种质材料的基因组DNA进行SSR-PCR扩增,共扩增出63条扩增条带,其中多态带60条,多态率为95.2%,获得了较好的扩增结果。通过进行相似系数和聚类分析,遗传相似系数为0.4133-0.9600,平均相似系数为0.6867;55份扁桃类植物种质间的遗传差异表明:不同种以及不同品种间的遗传距离不同,在相似系数小于0.68时,大多数栽培品种聚为一类,同一种源区的大多数栽培品种能聚类在一起。为进一步区分扁桃类植物种质资源亲缘关系远近提供了重要途径。

    一种快速制取巴旦木花粉的方法

    公开(公告)号:CN105993400A

    公开(公告)日:2016-10-12

    申请号:CN201610339474.8

    申请日:2016-05-21

    CPC classification number: A01D91/04 F26B3/22 F26B2200/02

    Abstract: 本发明涉及一种快速制取巴旦木花粉的方法,该方法是由采集巴旦木花苞、收集巴旦木花药以及高温烘烤等步骤完成,通过本发明所述方法能够当天操作简便的快速制取巴旦木花粉,当天进行人工授粉,完全能够满足在主栽品种的盛花期间进行人工授粉的要求。本方法节约了人员劳力成本,提高了巴旦木花粉制取效率,大大缩短了巴旦木花粉的制作时间,提高了花粉制作效率,解决了人工授粉过程中因外界自然环境不良原因造成的巴旦木主栽品种和授粉品种间花期不遇的问题,增加产量20%,减少巴旦木果农的损失,有效地增加了果农的经济效益。

    一种干旱区果树作物基因组DNA的提取方法

    公开(公告)号:CN103266107A

    公开(公告)日:2013-08-28

    申请号:CN201310236983.4

    申请日:2013-06-14

    Abstract: 本发明涉及一种干旱区果树作物基因组DNA的提取方法,该方法从干旱区果树植物叶片组织,特别是富含多糖多酚或淀粉的果树植物叶片组织中通过液氮研磨,转入离心管中,加入提取缓冲液,在水浴锅中温浴,离心,吸取上清液,将上清液转入另外两个新的离心管中,分别加入氯仿和异戊醇,离心,再吸取上清液,合并上清液,转入另一个新的离心管中,加入氯仿和异戊醇,离心,再次吸取上清液,将上清液转入另一个新的离心管中,加入冷冻无水乙醇,放入冰箱,离心,有清晰乳白色的DNA白絮沉淀,用乙醇洗涤,自然风干后,溶于缓冲溶液中,冰箱保存即可获得了高质量的果树基因组DNA,通过本发明所述的方法能够用于后续的PCR扩增及分子克隆等实验。为进一步的分子生物学技术在干旱区果树上的运用奠定了基础。

    一种基于SSR分子标记鉴别扁桃属植物种质的方法

    公开(公告)号:CN105512513B

    公开(公告)日:2018-04-13

    申请号:CN201510870315.6

    申请日:2015-12-02

    Abstract: 本发明涉及一种基于SSR分子标记鉴别扁桃属植物种质的方法,该方法通过选择多态性高的SSR引物,对55份扁桃属植物种质材料进行SSR-PCR扩增反应、电泳检测、统计分析。结果表明:使用筛选自核果类的100对SSR引物中的10对多态性强的引物,对扁桃属植物种质材料的基因组DNA进行SSR‑PCR扩增,共扩增出63条扩增条带,其中多态带60条,多态率为95.2%,获得了较好的扩增结果。通过进行相似系数和聚类分析,遗传相似系数为0.4133-0.9600,平均相似系数为0.6867;55份扁桃类植物种质间的遗传差异表明:不同种以及不同品种间的遗传距离不同,在相似系数小于0.68时,大多数栽培品种聚为一类,同一种源区的大多数栽培品种能聚类在一起。为进一步区分扁桃类植物种质资源亲缘关系远近提供了重要途径。

    新疆野扁桃TP-M13-SSR核心引物及其应用

    公开(公告)号:CN105969902A

    公开(公告)日:2016-09-28

    申请号:CN201610600667.4

    申请日:2016-07-27

    Abstract: 本发明涉及一种新疆野扁桃TP‑M13‑SSR核心引物及其应用,该引物具有扩增稳定、电泳条带清晰、多态性丰富的优点,利用在TP‑M13‑SSR扩增产物检测过程中的一种基于荧光测序技术的高通量低成本分析技术体系,本发明公开了新疆野扁桃TP‑M13‑SSR引物,它包括12对引物,本发明筛选出的12对TP‑M13‑SSR核心引物在新疆野扁桃基因组中分布均匀,带型清晰容易判读,同时适合普通变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测平台和毛细管荧光检测平台检测;多态性高;扩增重复性好,可完全适用于新疆野扁桃遗传多样性分析、品种鉴定以及聚类分析等方面的研究。

    新疆野扁桃自交不亲和SSK基因的克隆及双元表达载体的构建方法

    公开(公告)号:CN105255905A

    公开(公告)日:2016-01-20

    申请号:CN201510870324.5

    申请日:2015-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种新疆野扁桃自交不亲和SSK基因的克隆及双元表达载体的构建方法,该方法用TRIzol法提取新疆野扁桃花粉的总RNA,测定OD260/OD280比值为2.011;将PCR产物进行凝胶回收,回收后的产物与pMD-18T克隆载体进行连接,转化结束后进行质粒的提取,将提取的质粒进行PCR及酶切验证,获得了602bp的DNA条带;经测序该基因ORF为534bp,编码177个氨基酸的多肽,将该基因在NCBI上进行Blast比对,和蔷薇科李属(Prunus)的多个物种的SSK1基因的相似度高达98%,用限制性内切酶Pst I和BamH I将目的基因和pCAMBIA1303表达载体分别进行双酶切后,将质粒进行PCR反应及酶切验证;分别获得了12361bp的pCAMBIA1303载体和602bp的目的片段;说明双元表达载体构建成功,命名为p1303-PtSSK1。

    一种干旱区果树作物基因组DNA的提取方法

    公开(公告)号:CN103266107B

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201310236983.4

    申请日:2013-06-14

    Abstract: 本发明涉及一种干旱区果树作物基因组DNA的提取方法,该方法从干旱区果树植物叶片组织,特别是富含多糖多酚或淀粉的果树植物叶片组织中通过液氮研磨,转入离心管中,加入提取缓冲液,在水浴锅中温浴,离心,吸取上清液,将上清液转入另外两个新的离心管中,分别加入氯仿和异戊醇,离心,再吸取上清液,合并上清液,转入另一个新的离心管中,加入氯仿和异戊醇,离心,再次吸取上清液,将上清液转入另一个新的离心管中,加入冷冻无水乙醇,放入冰箱,离心,有清晰乳白色的DNA白絮沉淀,用乙醇洗涤,自然风干后,溶于缓冲溶液中,冰箱保存即可获得了高质量的果树基因组DNA,通过本发明所述的方法能够用于后续的PCR扩增及分子克隆等实验。为进一步的分子生物学技术在干旱区果树上的运用奠定了基础。

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