公开(公告)号：CN116004507A

公开(公告)日：2023-04-25

申请号：CN202310237676.1

申请日：2023-03-14

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 王波 ,  马洲洋 ,  潘绒 ,  任文静

IPC: C12N5/04 ,  C12N15/82 ,  C12N15/29

Abstract: 本发明公开了一种藜麦原生质体、制备方法以及梭梭耐逆基因瞬时表达体系。本发明通过将预处理的藜麦幼嫩子叶切取成0.5～1mm宽的细长条后置于酶解液中，25℃恒温条件下避光酶解10.5h，50rpm·min‑1震荡1.5h，得到酶解液；其中，所述酶解液pH为5.7、酶解液组成为0.3％MacerozymeR‑10+1.2％Cellulase‑R10+0.6mol·L‑1甘露醇+20mmol·L‑1MES+20mmol·L‑1KCl+10mmol·L‑1CaCl2+0.5％PVP+1g·L‑1BSA；往所述酶解液中添加等体积的W5水溶液，经100目筛网过滤，在室温、100×g速率下离心4min，弃上清液体，得到藜麦原生质体，该藜麦原生质体产量高、活力高、制备周期短、操作难度小，能用于建立基于藜麦原生质体的梭梭耐逆基因瞬时表达体系。