一种植物抗病相关蛋白NbXTH1其编码基因和应用

    公开(公告)号:CN114891812B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202210672471.1

    申请日:2022-06-15

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种植物抗病相关蛋白NbXTH1其编码基因和应用;本发明提供的蛋白,基于马铃薯病毒X(PVX)的表达系统,通过新开发的4维蛋白质组学,在P1SCSMV的异种表达中鉴定了显著下调的蛋白,命名为NbXTH1,来自本氏烟(Nicotiana benthamiana)。在本氏烟上通过农杆菌介导过表达NbXTH1后接种7种病毒与4种真菌,检测发现过表达NbXTH1后的叶片病毒积累量下调,真菌导致的坏死程度减弱,其抗病性明显增强。本发明可以运用在作物育种抗病性改良方面,有望提高植物的抗病性,从而达到增产减药的目的。

    一种本生烟NbPLP基因多克隆抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112301037A

    公开(公告)日:2021-02-02

    申请号:CN202011154988.9

    申请日:2020-10-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种本生烟NbPLP基因多克隆抗体及其制备方法和应用,包括(1)构建含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的重组表达载体,将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得NbPLP蛋白;(2)以所述NbPLP蛋白为抗原免疫动物,经血清分离纯化获得NbPLP蛋白多克隆抗体,利用本发明所提供的方法制备的多克隆抗体,能够特异性识别本生烟NbPLP,在本生烟NbPLP蛋白的检测和功能鉴定及其研究中具有广泛用途。NbPLP蛋白抗体的制备为检测本生烟NbPLP基因在病毒侵染过程中的表达情况及研究NbPLP蛋白的功能具有重要意义。

    莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN107385108B

    公开(公告)日:2020-10-23

    申请号:CN201710621619.8

    申请日:2017-07-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了莲藕中一种新马铃薯Y病毒科病毒的检测试剂盒,包括两条特异性引物,所述试剂盒还包括M‑MLV反转录酶、M‑MLV酶反应缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+和PCR反应缓冲液。本发明还提供一种莲藕中新马铃薯Y病毒科病毒的检测方法,其包括以下步骤:(1)提取待测样品总RNA,(2)设计并合成引物,(3)RT‑PCR,(4)电泳检测。本发明提供了一种在莲藕中检测新马铃薯Y病毒科病毒的试剂盒与检测方法,利用RT‑PCR方法检测莲藕中该新型马铃薯Y病毒科病毒,克服了分离莲藕病毒核酸的繁琐步骤,节省时间,大大提高了检测的可操作性、灵敏性和可重复性,为莲藕中该新型马铃薯Y病毒科病毒的防治、脱毒苗的检测提供了有效方法。

    一种提高植物抗病性的蛋白质及编码基因和应用

    公开(公告)号:CN118702792A

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202411021165.7

    申请日:2024-07-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,涉及一种提高植物抗病性的蛋白质及编码基因和应用,本发明提供的蛋白,基于马铃薯病毒X (PVX)的表达系统,通过新开发的4维蛋白质组学,在P1SCSMV的异种表达中鉴定了显著上调的蛋白,命名为NbEAS,来自本氏烟(Nicotiana benthamiana)。在本氏烟上通过农杆菌介导过表达NbEAS后接种7种病毒与4种真菌,检测发现过表达NbEAS后的叶片病毒积累量下调,真菌导致的坏死程度减弱,其抗病性明显增强。本发明可以运用在作物育种抗病性改良方面,有望提高植物的抗病性,从而达到增产减药的目的。

    一种本生烟NbAPX3基因多克隆抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112301044B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202011156014.4

    申请日:2020-10-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种本生烟NbAPX3基因多克隆抗体及其制备方法和应用,包括(1)构建含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的重组表达载体,将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得NbAPX3蛋白;(2)以所述NbAPX3蛋白为抗原免疫动物,经血清分离纯化获得NbAPX3蛋白多克隆抗体,利用本发明所提供的方法制备的多克隆抗体,能够特异性识别本生烟NbAPX3,在本生烟NbAPX3蛋白的检测和功能鉴定及其研究中具有广泛用途。NbAPX3蛋白抗体的制备为检测本生烟NbAPX3基因在病毒侵染过程中的表达情况及研究NbAPX3蛋白的功能具有重要意义。

    一种本生烟NbPLP基因多克隆抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN112301037B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN202011154988.9

    申请日:2020-10-26

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种本生烟NbPLP基因多克隆抗体及其制备方法和应用,包括(1)构建含有SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的重组表达载体,将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得NbPLP蛋白;(2)以所述NbPLP蛋白为抗原免疫动物,经血清分离纯化获得NbPLP蛋白多克隆抗体,利用本发明所提供的方法制备的多克隆抗体,能够特异性识别本生烟NbPLP,在本生烟NbPLP蛋白的检测和功能鉴定及其研究中具有广泛用途。NbPLP蛋白抗体的制备为检测本生烟NbPLP基因在病毒侵染过程中的表达情况及研究NbPLP蛋白的功能具有重要意义。

    一种甘薯潜隐病毒莲藕分离物RT-qPCR检测试剂盒与检测方法

    公开(公告)号:CN110295253A

    公开(公告)日:2019-10-01

    申请号:CN201910565436.8

    申请日:2019-06-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种甘薯潜隐病毒莲藕分离物RT-qPCR检测试剂盒与检测方法,其试剂盒包括2条特异性引物:qSPLV-lotus-F和qSPLV-lotus-R,M-MLV反转录酶、M-MLV酶反应缓冲液、dNTPs、SYBR Green DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液等。本发明还公开了一种在莲藕中检测甘薯潜隐病毒莲藕分离物的方法。本发明方法与常规RT-PCR相比,提升检测甘薯潜隐病毒莲藕分离物灵敏度100倍,适宜脱毒莲藕种苗的检测。本发明在分子水平上为甘薯潜隐病毒莲藕分离物的检测提供了一种快速、灵敏的方法,也为莲藕脱毒苗的制备提供了有效的检测方法。

    一种甘薯潜隐病毒莲藕分离物RT-RPA检测试剂盒与检测方法

    公开(公告)号:CN110283942A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910584680.9

    申请日:2019-07-01

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种甘薯潜隐病毒莲藕分离物RT-RPA检测试剂盒与检测方法,其试剂盒包括2条特异性引物:SPLV-lotusRPA-F:GTCAACCATCCGCAACACCACCACAGTCAA;SPLV-lotusRPA-R:TCTTTGTGGGTATTGCACGCAGCCGAGGTA,Prime Script™Reverse Transcriptase反转录酶、Oligo(dT)15Primer、Ribonuclease Inhibitor抑制酶、dNTP、DNA Marker、pMD18-T载体、RNA提取试剂盒、DNA凝胶回收试剂盒、TwistAmp®DNA amplification kits和Mg2+。本发明以在非实验室的条件下完成核酸扩增,在分子水平上为甘薯潜隐病毒莲藕分离物的检测提供了一种快速、灵敏、高通量的方法,适用于大量莲藕样品的检测。

    一种莲藕潜隐病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒及制备与检测方法

    公开(公告)号:CN109239351B

    公开(公告)日:2020-07-14

    申请号:CN201810906809.9

    申请日:2018-08-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种莲藕潜隐病毒双抗体夹心酶联免疫检测试剂盒及制备与检测方法,其包括ELISA用微孔板,酶标抗体,缓冲液,显色液,终止液,其中微孔板上包被有LLV特异的多克隆抗体,酶标抗体为辣根过氧化酶标记得LLV特异性多克隆抗体。本发明采用的免疫原为基因工程表达的LLV外壳蛋白抗原。本发明还公开了一种莲藕潜隐病毒的检测方法。本发明在血清学水平上为莲藕潜隐病毒的检测提供了一种快速、灵敏、简便的方法,并且经济实用,也为莲藕生产中莲藕潜隐的防治及其脱毒苗的制备提供了有效的检测方法。

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