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公开(公告)号：CN110628736B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201910955751.1
申请日：2019-10-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种色氨酸2,3双加氧酶突变体及其制备方法和应用，属于蛋白质工程领域。本发明色氨酸2,3双加氧酶突变体由色氨酸2,3双加氧酶的氨基酸序列在第51位和第127位进行突变得到。本发明构建的生物催化剂可以利用不带有保护基的色氨酸、5‑氯色氨酸和6‑氯色氨酸作为底物，一步合成3a‑羟基六氢吡咯[2,3‑b]吲哚‑2‑羧酸（HPICs）及其衍生物。该新型酶将色氨酸双加氧酶转化为单加氧酶，其产生HPICs的量远远大于野生型色氨酸2,3双加氧酶产生HPICs的量，具有优秀非对映选择性；反应和纯化过程均在环保的水溶液中，在室温下进行，反映体系简单，反应条件温和，低能耗。
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公开(公告)号：CN108467861A
公开(公告)日：2018-08-31
申请号：CN201810391903.5
申请日：2018-04-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程领域，涉及一种利用脂肪酸催化合成线性ɑ-烯烃的生物催化剂OleT-BM3R的序列、制备方法及其应用。生物催化剂OleT-BM3R是将咸海鲜球菌（Jeotgalicoccus sp.ATCC 8456）脂肪酸脱羧酶OleTJE与巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)脂肪酸羟化酶CYP102A1(P450BM3)的还原酶结构域融合而得。本发明中提供的线性ɑ-烯烃合成酶OleT-BM3R利用脂肪酸作为底物、一步实现脱羧的方法具有的优点有：1）反应原料为可再生且易获得的脂肪酸，能够减少线性ɑ-烯烃合成对石油工业的依赖；2）反应在环保的水溶液中、室温下进行、反应条件温和、低能耗；3）反应催化效率高、稳定性好、底物范围广、反应体系简单。因此在制备线性ɑ-烯烃方面具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114921427B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202210491196.3
申请日：2022-05-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/10 , C12P7/42 , C12P17/04 , C12P17/12 , C12P7/6409 , C12P7/6427
Abstract: 本发明公开了一种将羧酸转化为β‑羟基羧酸的人工酶，属于蛋白质工程领域。本发明羧酸β‑羟基化酶P450BSβ突变体是由野生型羧酸羟基化酶P450BSβ的氨基酸序列在第78位、85位和290位突变得到的。羧酸β‑羟基化酶P450BSβ‑L78I/Q85H/G290I是在脂肪酸β‑羟基化酶P450BSβ‑L78A/Q85A/V170I/G290I的基础上改进后得到的产率更高、底物范围更广的人工酶。本发明构建的人工酶催化的底物范围扩展为C6‑C20链长的天然直链饱和脂肪酸、天然不饱和脂肪酸以及非天然羧酸。本发明可将这些底物一步转化为相应的(R)‑β‑羟基羧酸。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112111477A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202011059690.X
申请日：2020-09-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种利用过氧化氢将脂肪酸转化为烯烃的人工生物催化剂，属于蛋白质工程领域。本发明构建的生物催化剂可以利用过氧化氢作为直接的电子供体，脂肪酸为底物直接合成1‑烯烃。催化的底物范围扩展为C6‑C18链长的直链饱和脂肪酸以及油酸和亚油酸不饱和脂肪酸。引入葡萄糖氧化酶提供过氧化氢的双酶体系为该反应提供缓慢、持续、温和的过氧化氢，极大的降低了反应中酮类物质的生成，进一步提高了1‑烯烃合成的效率。该反应体系直接利用过氧化氢作为电子供体，不需要昂贵的辅酶因子和伴侣蛋白的参与。本发明所述的催化剂效率更高、可以使反应更简洁、反应条件温和、底物范围广、成本更为低廉，具有良好的工业生产前景。
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公开(公告)号：CN110628736A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201910955751.1
申请日：2019-10-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种色氨酸2,3双加氧酶突变体及其制备方法和应用，属于蛋白质工程领域。本发明色氨酸2,3双加氧酶突变体由色氨酸2,3双加氧酶的氨基酸序列在第51位和第127位进行突变得到。本发明构建的生物催化剂可以利用不带有保护基的色氨酸、5-氯色氨酸和6-氯色氨酸作为底物，一步合成3a-羟基六氢吡咯[2,3-b]吲哚-2-羧酸（HPICs）及其衍生物。该新型酶将色氨酸双加氧酶转化为单加氧酶，其产生HPICs的量远远大于野生型色氨酸2,3双加氧酶产生HPICs的量，具有优秀非对映选择性；反应和纯化过程均在环保的水溶液中，在室温下进行，反映体系简单，反应条件温和，低能耗。
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公开(公告)号：CN114921427A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210491196.3
申请日：2022-05-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/10 , C12P7/42 , C12P17/04 , C12P17/12 , C12P7/6409 , C12P7/6427
Abstract: 本发明公开了一种将羧酸转化为β‑羟基羧酸的人工酶，属于蛋白质工程领域。本发明羧酸β‑羟基化酶P450BSβ突变体是由野生型羧酸羟基化酶P450BSβ的氨基酸序列在第78位、85位和290位突变得到的。羧酸β‑羟基化酶P450BSβ‑L78I/Q85H/G290I是在脂肪酸β‑羟基化酶P450BSβ‑L78A/Q85A/V170I/G290I的基础上改进后得到的产率更高、底物范围更广的人工酶。本发明构建的人工酶催化的底物范围扩展为C6‑C20链长的天然直链饱和脂肪酸、天然不饱和脂肪酸以及非天然羧酸。本发明可将这些底物一步转化为相应的(R)‑β‑羟基羧酸。
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公开(公告)号：CN112111477B
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202011059690.X
申请日：2020-09-30
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种利用过氧化氢将脂肪酸转化为烯烃的人工生物催化剂，属于蛋白质工程领域。本发明构建的生物催化剂可以利用过氧化氢作为直接的电子供体，脂肪酸为底物直接合成1‑烯烃。催化的底物范围扩展为C6‑C18链长的直链饱和脂肪酸以及油酸和亚油酸不饱和脂肪酸。引入葡萄糖氧化酶提供过氧化氢的双酶体系为该反应提供缓慢、持续、温和的过氧化氢，极大的降低了反应中酮类物质的生成，进一步提高了1‑烯烃合成的效率。该反应体系直接利用过氧化氢作为电子供体，不需要昂贵的辅酶因子和伴侣蛋白的参与。本发明所述的催化剂效率更高、可以使反应更简洁、反应条件温和、底物范围广、成本更为低廉，具有良好的工业生产前景。
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公开(公告)号：CN108467861B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201810391903.5
申请日：2018-04-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程领域，涉及一种利用脂肪酸催化合成线性ɑ‑烯烃的生物催化剂OleT‑BM3R的序列、制备方法及其应用。生物催化剂OleT‑BM3R是将咸海鲜球菌（Jeotgalicoccus sp.ATCC 8456）脂肪酸脱羧酶OleTJE与巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)脂肪酸羟化酶CYP102A1(P450BM3)的还原酶结构域融合而得。本发明中提供的线性ɑ‑烯烃合成酶OleT‑BM3R利用脂肪酸作为底物、一步实现脱羧的方法具有的优点有：1）反应原料为可再生且易获得的脂肪酸，能够减少线性ɑ‑烯烃合成对石油工业的依赖；2）反应在环保的水溶液中、室温下进行、反应条件温和、低能耗；3）反应催化效率高、稳定性好、底物范围广、反应体系简单。因此在制备线性ɑ‑烯烃方面具有良好的应用前景。
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