一种制备兔脱细胞气管基质的方法

    公开(公告)号:CN109954164B

    公开(公告)日:2022-03-11

    申请号:CN201910263678.1

    申请日:2019-04-02

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种制备兔脱细胞气管基质的方法包括如下步骤:以新鲜兔气管为原料,在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解48h,进入第一个脱细胞循环:4%w/v(g/ml)脱氧胆酸钠溶液浸泡,置于20℃摇床孵育4h;再用无菌PBS冲洗2遍,然后置于含有50kU/mL浓度Dnase I的1 mol/L NaCl中,连续晃动3h,以溶解细胞核并降解DNA,最后用PBS冲洗2遍;以同样的流程进行下一个脱细胞循环周期,共计进行2个周期的处理。本发明意外地发现,经过改良的DEM处理,仅需要2个周期内可制备与原生气管相似结构的脱细胞基质,其黏膜上皮细胞被完全去除、少数软骨细胞残留、结构完整、免疫原性弱、炎性细胞浸润少,缩短临床准备时间,为需要紧急气管支架的患者提供治疗基础和希望。

    一种制备兔脱细胞气管基质的方法

    公开(公告)号:CN109954164A

    公开(公告)日:2019-07-02

    申请号:CN201910263678.1

    申请日:2019-04-02

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种制备兔脱细胞气管基质的方法包括如下步骤:以新鲜兔气管为原料,在4℃无菌蒸馏水中渗透溶解48h,进入第一个脱细胞循环:4%w/v(g/ml)脱氧胆酸钠溶液浸泡,置于20℃摇床孵育4h;再用无菌PBS冲洗2遍,然后置于含有50kU/mL浓度Dnase I的1 mol/L NaCl中,连续晃动3h,以溶解细胞核并降解DNA,最后用PBS冲洗2遍;以同样的流程进行下一个脱细胞循环周期,共计进行2个周期的处理。本发明意外地发现,经过改良的DEM处理,仅需要2个周期内可制备与原生气管相似结构的脱细胞基质,其黏膜上皮细胞被完全去除、少数软骨细胞残留、结构完整、免疫原性弱、炎性细胞浸润少,缩短临床准备时间,为需要紧急气管支架的患者提供治疗基础和希望。

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