公开(公告)号：CN113430161A

公开(公告)日：2021-09-24

申请号：CN202110878402.1

申请日：2021-07-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张兵 ,  陈思 ,  徐鑫 ,  束方智

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种高效分离制备狗牙根原生质体的方法，包括以下步骤：(1)狗牙根叶片撕裂成条；(2)加入纤维素酶和离析酶真空抽滤；(3)纤维素酶和离析酶孵育酶解去除细胞壁；(4)离心收集酶解的细胞；(5)洗涤细胞去除残余酶液；(6)重新离心获得原生质体细胞。本发明中的狗牙根作为一种重要的暖季型草坪草，具有常异交、倍性复杂的遗传学特点，对其进行传统杂交育种较为困难，而细胞工程育种则可以克服这些困境快速的培育新品种，而本发明的狗牙根原生质体制备方法可以高效制备狗牙根原生质体，为基于细胞融合和基因转化的狗牙根细胞工程育种和分子生物学研究提供重要材料，具有较大的应用价值。

公开(公告)号：CN113430161B

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202110878402.1

申请日：2021-07-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张兵 ,  陈思 ,  徐鑫 ,  束方智

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种高效分离制备狗牙根原生质体的方法，包括以下步骤：(1)狗牙根叶片撕裂成条；(2)加入纤维素酶和离析酶真空抽滤；(3)纤维素酶和离析酶孵育酶解去除细胞壁；(4)离心收集酶解的细胞；(5)洗涤细胞去除残余酶液；(6)重新离心获得原生质体细胞。本发明中的狗牙根作为一种重要的暖季型草坪草，具有常异交、倍性复杂的遗传学特点，对其进行传统杂交育种较为困难，而细胞工程育种则可以克服这些困境快速的培育新品种，而本发明的狗牙根原生质体制备方法可以高效制备狗牙根原生质体，为基于细胞融合和基因转化的狗牙根细胞工程育种和分子生物学研究提供重要材料，具有较大的应用价值。