公开(公告)号：CN113136379A

公开(公告)日：2021-07-20

申请号：CN202110383094.5

申请日：2021-04-09

Applicant: 扬州大学

Inventor： 贾禄强 ,  李腾 ,  黄阿根

IPC: C12N9/36 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供了一种强化毕赤酵母表达外源蛋白的方法，所述方法包括当MutS型毕赤酵母的发酵进入甘油流加阶段时，间歇性控制甘油流加工艺参数使细胞在ROS快速积累胁迫生长环境和ROS未积累胁迫生长环境之间循环4‑6次，所述ROS快速积累胁迫生长环境中发酵液的溶解氧浓度为20‑40％，甘油浓度0‑1g/L，维持4‑5h；所述ROS未积累胁迫生长环境中发酵液的溶解氧浓度为～0％，甘油浓度为2‑5g/L，维持0.5‑1.5h。采用本发明的方法，在细胞生长阶段结束时，ROS的浓度处于最低水平，实现了短时间内获得大量的结构完整、功能健全的毕赤酵母细胞的目标，强化了诱导期内外源蛋白表达。

公开(公告)号：CN114045320A

公开(公告)日：2022-02-15

申请号：CN202111321044.0

申请日：2021-11-09

Applicant: 扬州大学

Inventor： 贾禄强 ,  李天翼 ,  王庆玲 ,  李腾

IPC: C12P21/00 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供了一种基于改良型DO‑stat策略调控毕赤酵母表达外源蛋白的方法，所述方法包括当Mut+型重组毕赤酵母进入甲醇流加诱导阶段时，采用在线指数和DO‑stat相结合策略进行甲醇流加控制，以将DO的震荡宽度范围控制在10‑30％，甲醇浓度控制在0‑2g/L。采用本发明的方法，胞内的有毒的代谢物(甲醇和甲醛)维持在了零水平；且甲醇消耗/流加速度被明显提高了。