公开(公告)号：CN117737109A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202310574414.4

申请日：2023-05-19

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘思安 ,  褚伊萱 ,  张瀚月 ,  万鹏 ,  王莉

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H7/00

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9技术的银杏基因敲除载体及其应用，所述银杏基因敲除载体为CRISPR/Cas9敲除载体pYLCRISPR‑AtU3d‑AtU3b‑AtU6‑1‑Cas9载体，该载体以多元载体pYLCRISPR/Cas9Pubi‑N为骨架，同时连入了sgRNA元件和Cas9元件，其中sgRNA元件包括sgRNA启动子和靶位点序列。本发明构建银杏基因敲除载体，首次突破了银杏无法进行基因编辑的技术瓶颈，利用该技术获得了黄酮含量提高3倍以上的银杏植株，银杏通过该技术可以培育出符合人类期望的新品种，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN117625616A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202311636514.1

申请日：2023-11-30

Applicant: 扬州大学 ,  沛县园林服务中心

Inventor： 刘思安 ,  万鹏 ,  张瀚月 ,  仇雨钰 ,  褚伊萱 ,  操萌 ,  王莉 ,  周敏 ,  刘艳

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H7/00

Abstract: 本发明公开了一类长链非编码RNA及其在银杏类黄酮含量调控中的应用，所述长链非编码RNA包括RNA LncNAT30、RNALncNAT31、RNA LncNAT3、RNA LncNAT11中任意一种或者多种，其核苷酸序列分别由SEQ NO.1‑4所示。本发明提供的非编码RNA在银杏中过量表达后，用于调控银杏类黄酮合成，过量表达长链非编码RNA后类黄酮含量显著降低，这表明非编码RNA是调控银杏类黄酮合成的关键lncRNA，通过非编码RNA的过表达或者敲除来调控银杏类黄酮的含量，同时可以通过沉默非编码RNA后能够显著提高类黄酮的含量，本发明为培育出类黄酮含量高的银杏提供了重要的科学依据和技术支撑。

公开(公告)号：CN117625614A

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202311635257.X

申请日：2023-11-30

Applicant: 扬州大学 ,  沛县园林服务中心

Inventor： 刘思安 ,  张瀚月 ,  孟钊龙 ,  万鹏 ,  帅银龙 ,  王莉 ,  赵巍 ,  刘松 ,  赵枫

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/84 ,  A01H7/00

Abstract: 本发明公开了一种通过沉默提升银杏类黄酮含量的关键miRNA及其应用，该关键银杏miR828a其前体序列和成熟体序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，其银杏miR828的沉默序列如SEQ ID NO.3所示。本发明提供的银杏miR828a可以用于调控银杏类黄酮合成，过量表达miR828a后类黄酮含量显著降低，然而沉默miR828a后能够显著提高类黄酮的含量，这表明miR828a是调控银杏类黄酮合成的关键miRNA，通过对miR828a的过量表达或沉默来调控银杏类黄酮的含量，能够按照需求培育出类黄酮含量高的银杏，因此在银杏分子育种过程中具有重要的应用价值。