-
公开(公告)号：CN103060363A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310031718.2
申请日：2013-01-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及医学微生物学领域，具体涉及一种淋病奈瑟菌的转化方法。该方法是将淋病奈瑟菌分别经液体及固体培养基培养后，收集细菌于离心管中；细菌经冰浴静置、充分洗涤和悬浮后制得淋病奈瑟菌感受态作为转化用受体菌备用；通过电转化方法将原核表达载体转入到上述备用的淋病奈瑟菌感受态中，用酶切和PCR方法筛选鉴定重组淋病奈瑟菌。本发明通过优化淋病奈瑟菌的培养条件，制备了淋病奈瑟菌感受态，建立了淋病奈瑟菌的转化方法，此转化方法简便易行，获得的重组菌性质稳定，为今后淋病奈瑟菌感染机制和疫苗效果的研究奠定了基础。同时，该转化方法的建立进一步拓宽了淋病奈瑟菌的研究领域。
-
公开(公告)号：CN102020717B
公开(公告)日：2012-09-26
申请号：CN201010533669.9
申请日：2010-11-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种增强淋巴细胞靶向杀伤肿瘤的活性因子及其制备方法，所说的活性因子的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。它通过以下方法制得：利用PCR分别扩增出SEQIDNO：2-4的片段，将这三个片段串联插入pQ31载体，各片段中间接上柔性片段；得到融合蛋白表达载体；再将融合蛋白表达载体转化入M15大场杆菌菌株，经IPTG诱导表达，然后洗涤包涵体，变性条件下用Ni+-ITA树脂纯化，进一步复性后得到dsNKg2D-IL-15蛋白。本发明能在体外大量表达dsNKg2D-IL-15蛋白，并且表达的蛋白在生理环境下稳定而不降解，具备使肿瘤细胞反式递呈IL-15激活NK细胞的活性。
-
公开(公告)号：CN102382844A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110293170.X
申请日：2011-10-07
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及医学微生物学领域，具体涉及一种淋病奈瑟菌免疫阻遏基因Δrmp及突变方法。所述淋病奈瑟菌免疫阻遏突变基因Δrmp，它的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示。该突变基因通过下述方法和得：是以淋病奈瑟菌基因组DNA为模板，PCR扩增rmp基因，并连接到T载体pMD19中，以连接产物pMD19rmp为模板，扩增包含rmp基因下游侧翼区、pMD19载体骨架和rmp基因上游侧翼区的线性DNA片段，与相同酶切处理的卡那霉素抗性基因Kanr连接，得到的突变基因Δrmp。
-
公开(公告)号：CN101988049A
公开(公告)日：2011-03-23
申请号：CN201010534375.8
申请日：2010-11-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及涉及一种共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法。所说的转基因细胞能稳定共表达膜型IL-15和Rae-1ε蛋白的转基因细胞BaF3细胞。它可通过下述方法制备：利用PCR技术扩增了小鼠Rae-1ε基因和小鼠膜表达型的IL-15基因，将它们分别插入到真核表达载体pVITRO2-mcs的两个多克隆位点，获得重组载体，将重组载体转染小鼠肿瘤细胞株BaF3，经抗生素筛选和流式细胞仪分选后，获得转基因细胞。该转基因细胞可为IKDC提供三重的刺激信号，作为体外高效扩增和活化IKDC的工具。此外，该转基因细胞还可以用于抗肿瘤的免疫治疗研究。
-
公开(公告)号：CN101041816A
公开(公告)日：2007-09-26
申请号：CN200610098087.6
申请日：2006-12-01
Applicant: 扬州大学
Abstract: 人工抗原递呈细胞及其制备方法，涉及一种新型抗原递呈细胞的制备方法。以人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞为载体，转染表达CD32a的真核表达载体，通过G418筛选，流式细胞仪分选将CD32分子稳定表达在K562细胞表面，形成K32细胞；制备双表达CD86和4－1BBL共刺激信号的真核表达载体；将真核表达载体转染K32细胞，通过潮霉素筛选，流式细胞仪分选得到稳定表达CD86和4－1BBL分子的K32细胞，即为人工抗原递呈细胞。本发明易于大量制备、成本低、重复性好、刺激CTL细胞活化效应高，同时递呈CTL活化的双重信号，能有效抑制凋亡。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102382844B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201110293170.X
申请日：2011-10-07
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及医学微生物学领域，具体涉及一种淋病奈瑟菌免疫阻遏基因Δrmp及突变方法。所述淋病奈瑟菌免疫阻遏突变基因Δrmp，它的核苷酸序列如SEQIDNO.10所示。该突变基因通过下述方法获得：是以淋病奈瑟菌基因组DNA为模板，PCR扩增rmp基因，并连接到T载体pMD19中，以连接产物pMD19rmp为模板，扩增包含rmp基因下游侧翼区、pMD19载体骨架和rmp基因上游侧翼区的线性DNA片段，与相同酶切处理的卡那霉素抗性基因Kanr连接，得到的突变基因Δrmp。
-
公开(公告)号：CN101041816B
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN200610098087.6
申请日：2006-12-01
Applicant: 扬州大学
Abstract: 人工抗原递呈细胞及其制备方法，涉及一种新型抗原递呈细胞的制备方法。以人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞为载体，转染表达CD32a的真核表达载体，通过G418筛选，流式细胞仪分选将CD32分子稳定表达在K562细胞表面，形成K32细胞；制备双表达CD86和4-1BBL共刺激信号的真核表达载体；将真核表达载体转染K32细胞，通过潮霉素筛选，流式细胞仪分选得到稳定表达CD86和4-1BBL分子的K32细胞，即为人工抗原递呈细胞。本发明易于大量制备、成本低、重复性好、刺激CTL细胞活化效应高，同时递呈CTL活化的双重信号，能有效抑制凋亡。
-
公开(公告)号：CN101173296A
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：CN200710133803.4
申请日：2007-10-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 广谱细菌宿主绿色荧光蛋白表达载体的构建方法，涉及微生物学领域。技术方案是：PCR扩增氨苄青霉素抗性基因的Amp启动子，将Amp启动子与绿色荧光蛋白结构基因连接，得到以其启动绿色荧光蛋白表达的广谱型原核表达载体。本发明利用能在细菌中广泛发挥作用的氨苄青霉素抗性基因(Amp)的启动子构建了一种广谱型GFP表达载体，所构建的载体表达GFP不受细菌型别和种类的限制，也不受细菌生长环境的限制，只要转化进细菌细胞，即可发挥作用，表达GFP，因而大大扩展了应用领域。
-
公开(公告)号：CN101173280A
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：CN200710133804.9
申请日：2007-10-22
Applicant: 扬州大学
Abstract: 人膜协同因子蛋白小基因pMCP的构建方法，涉及病原生物学领域。首先以人血细胞基因组DNA为模板，采用PCR方法，克隆人膜协同因子蛋白基因的启动子；以pSG5－MCP为模板扩增人膜协同因子蛋白cDNA；然后采用重叠PCR方法将MCP启动子和cDNA拼接起来，用获得的DNA片段替换出pcDNA3.1中的CMV启动子，构建成人膜协同因子蛋白小基因pMCP。通过本发明方法建立的转基因小鼠可改变以往人类特异性病原体感染性疾病研究中缺乏理想动物模型的局面，突破相应病原体感染致病机理、疫苗评价、药物评价等方面的限制。
-
公开(公告)号：CN101988049B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201010534375.8
申请日：2010-11-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及涉及一种共表达小鼠膜型白细胞介素15和Rae-1ε的转基因细胞及其制备方法。所说的转基因细胞能稳定共表达膜型IL-15和Rae-1ε蛋白的转基因细胞BaF3细胞。它可通过下述方法制备：利用PCR技术扩增了小鼠Rae-1ε基因和小鼠膜表达型的IL-15基因，将它们分别插入到真核表达载体pVITRO2-mcs的两个多克隆位点，获得重组载体，将重组载体转染小鼠肿瘤细胞株BaF3，经抗生素筛选和流式细胞仪分选后，获得转基因细胞。该转基因细胞可为IKDC提供三重的刺激信号，作为体外高效扩增和活化IKDC的工具。此外，该转基因细胞还可以用于抗肿瘤的免疫治疗研究。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
12
records
(took 0.015 seconds)
