公开(公告)号：CN120041513A

公开(公告)日：2025-05-27

申请号：CN202510242155.4

申请日：2025-03-03

Applicant: 扬州大学

Inventor： 毕洪论 ,  张贺 ,  冯从经 ,  刘钰林 ,  胡冬春

IPC: C12N15/89 ,  C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  A01K67/68 ,  A01N63/60 ,  A01P7/04

Abstract: 本发明公开了一种构建亚洲玉米螟GBP基因纯合突变体的方法，利用RACE技术扩增克隆亚洲玉米螟GBP基因序列，亚洲玉米螟GBP基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；在亚洲玉米螟GBP基因序列的2号外显子设计两个sgRNA靶标序列，通过体外转录合成靶点sgRNA，靶点sgRNA与Cas9蛋白体外融合形成RNP混合物，将RNP混合物注入亚洲玉米螟卵中；利用靶点检测引物对靶点进行PCR扩增，测序确认突变个体，杂交，自交得到GBP纯合突变体种群。本发明通过构建亚洲玉米螟GBP基因纯合突变体，导致突变体生殖和免疫功能显著下降，为后期开发形成高效的害虫生物农药提供借鉴和研究基础。

公开(公告)号：CN109666718A

公开(公告)日：2019-04-23

申请号：CN201811540526.3

申请日：2018-12-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 冯从经 ,  陈康康 ,  张一强 ,  王李宝 ,  唐泰 ,  刘旭 ,  宋佳惠

IPC: C12Q1/6804 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明涉及一种抗体介导的痕量吡虫啉农药残留的PCR管式检测方法,包括如下步骤：光敏PCR管壁处理；农药抗体与管壁结合；封闭；吡虫啉农药包被:以不同浓度的吡虫啉农药包被PCR管，4℃过夜，洗涤PCR管，干燥待用；生物素标记DNA；吡虫啉农药单克隆抗体+亲和素+生物素标记DNA的偶联；定量PCR检测；数据处理与分析。相对于现有技术,本方法检出限目前可以达到0.08 mg/kg，是市场在售试剂盒检测方法中检出限最低的方法之一。与同类型产品比较在成本上具有较大优势。具有快速、准确、高效等特点，拥有较大的市场开发潜力。采用本方法原理不仅可以解决农药吡虫啉的快速检测问题，还可以推广应用到其他多种农药的快速检测技术研发上。