公开(公告)号：CN109837293A

公开(公告)日：2019-06-04

申请号：CN201711194355.9

申请日：2017-11-24

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  王海鹏 ,  柴智 ,  徐开 ,  周子鉴 ,  章小玲 ,  陈鉴冰 ,  王静 ,  于雪

IPC: C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N1/19 ,  C12N15/85 ,  C12N15/81 ,  C12N15/67

Abstract: 本发明提供了一种能够增强蛋白质合成效率的串联DNA元件，具体地，本发明的核酸构建物由真核细胞（如酵母）来源的IRES增强子（如ScBOI1、ScFLO8、ScNCE102、ScMSN1、KlFLO8、KlNCE102、KlMSN1、KlBOI1）、Ω序列以及酵母特异性的Kozak序列串联而成。在酵母体外生物合成体系（如酵母体外蛋白合成体系）中应用本发明的核酸构建物，可显著提高蛋白合成效率。

公开(公告)号：CN109321620A

公开(公告)日：2019-02-12

申请号：CN201710642759.3

申请日：2017-07-31

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  柴智 ,  周子鉴 ,  徐开 ,  刘帅龙 ,  于雪

IPC: C12P21/02

CPC classification number: C12P21/02

Abstract: 本发明提供了一种蛋白合成冻干制剂及其制备方法和应用，具体地，本发明提供的无细胞冻干制剂，可显著提高外源蛋白的合成活性。

公开(公告)号：CN117165620A

公开(公告)日：2023-12-05

申请号：CN202311042670.5

申请日：2017-08-31

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  代田纯 ,  薛银鸽 ,  李海洋 ,  王海鹏 ,  柴智 ,  刘帅龙 ,  于雪

IPC: C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/645 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明提供了一种细胞中内源性表达RNA聚合酶的核酸构建物，具体地，发现了一种可大幅度增强蛋白质翻译效率的新型核酸构建物，本发明的核酸构建物由具有特定启动强度的启动子(如RNR2、ADH1、GAPDH、TEF1、PGK1、SED1等)和RNAP(如T7RNAP、T3RNAP、T4RNAP、T5RNAP等)蛋白的编码序列构成，在酵母体外蛋白质合成体系中应用本发明的核酸构建物，所合成的荧光素酶活性的相对光单位值(RLU)非常高，可达到与外源加入T7RNAP相同效果，可高达6.6×107。

公开(公告)号：CN109988801A

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201711469836.6

申请日：2017-12-29

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  柴智 ,  王海鹏 ,  徐开 ,  周子鉴 ,  于雪

IPC: C12P21/00

Abstract: 本发明提供了一种用于体外生物反应体系的新型的高效的能源再生体系(BES)、试剂盒及制备方法，本发明的生物能源再生体系，可应用于体外生物合成的能量供应，并应用于无细胞体外生物反应体系中，节约了体外生物合成的成本，提高了体外无细胞生物合成的能力。

公开(公告)号：CN109593656A

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201710915797.1

申请日：2017-09-30

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  刘帅龙 ,  柴智 ,  王海鹏 ,  于雪

IPC: C12N1/06 ,  C12R1/865 ,  C12R1/84 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12N1/063

Abstract: 本发明提供了一种新型细胞提取液的制备方法，具体地，本发明首次意外地发现了一种能够大规模、高效率、低成本的制备细胞提取物的方法。本发明通过对冷激处理过的细胞原料（优选酵母细胞原料）进行低温液氮机械破碎处理，并对所获得的细胞提取物进行体外活性检测（优选体外蛋白生物合成的活性检测），结果表明，用本发明的制备方法所获得的细胞提取物具有非常高的体外蛋白合成能力。

公开(公告)号：CN108690139A

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201710642517.4

申请日：2017-07-31

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  代田纯 ,  王海鹏 ,  薛银鸽 ,  柴智 ,  刘帅龙 ,  于雪

IPC: C07K19/00 ,  C12N9/14 ,  C12N15/62 ,  C12P21/00 ,  C12N9/02

CPC classification number: C07K2319/00 ,  C07K2319/02 ,  C12N9/0069 ,  C12N9/14 ,  C12P21/00 ,  C12Y113/12007 ,  C12Y306/04013

Abstract: 本发明提供了一种新型融合蛋白的制备及其在提高蛋白质合成的应用，具体地，本发明提供的融合蛋白可大幅度的提高体外翻译效率。此外，本发明还发现，在eIF4G前插入组成型或诱导型启动子(如pKlPGK1)可显著增强体外蛋白质的合成能力。

公开(公告)号：CN109423496B

公开(公告)日：2023-09-15

申请号：CN201710768550.1

申请日：2017-08-31

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  代田纯 ,  薛银鸽 ,  李海洋 ,  王海鹏 ,  柴智 ,  刘帅龙 ,  于雪

IPC: C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种细胞中内源性表达RNA聚合酶的核酸构建物，具体地，发现了一种可大幅度增强蛋白质翻译效率的新型核酸构建物，本发明的核酸构建物由具有特定启动强度的启动子（如RNR2、ADH1、GAPDH、TEF1、PGK1、SED1等）和RNAP（如T7RNAP、T3RNAP、T4RNAP、T5RNAP等）蛋白的编码序列构成，在酵母体外蛋白质合成体系中应用本发明的核酸构建物，所合成的荧光素酶活性的相对光单位值（RLU）非常高，可达到与外源加入T7RNAP相同效果。可高达6.6×107。

公开(公告)号：CN109971783A

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201711452033.X

申请日：2017-12-28

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  徐开 ,  陈鉴冰 ,  周子鉴 ,  柴智 ,  章小铃 ,  王海鹏 ,  于雪

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明提供了一种体外蛋白合成体系、试剂盒及其制备方法，具体地，本发明由特定比例的(a)细胞提取物；和(b)第一反应促进剂混合所形成的无细胞的体外蛋白合成体系可显著提高外源蛋白的合成效率。

公开(公告)号：CN108949801B

公开(公告)日：2019-06-14

申请号：CN201711194472.5

申请日：2017-11-24

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  薛银鸽 ,  代田纯 ,  姜灵轩 ,  郑竹霞 ,  柴智 ,  刘帅龙 ,  于雪

IPC: C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/67 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12N9/22 ,  C12N15/67 ,  C12N15/815

Abstract: 本发明提供了一种通过对核酸酶系统敲除以调控体外生物合成活性的方法，具体地，从很多种核酸酶中筛出5种核酸酶，其中对其中一种核酸酶(如EXN53)进行下调或敲除处理，发现可以提高核酸的稳定性，并显著提高体外蛋白质合成体系产生蛋白质的效率。

公开(公告)号：CN109423497A

公开(公告)日：2019-03-05

申请号：CN201710771090.8

申请日：2017-08-31

Applicant: 康码(上海)生物科技有限公司

Inventor： 郭敏 ,  王海鹏 ,  柴智 ,  刘帅龙 ,  于雪

IPC: C12N15/81

CPC classification number: C12N15/81 ,  C12N15/815 ,  C12N2840/203

Abstract: 本发明提供了一种增强蛋白质合成效率的RNA元件，具体地，本发明发现了由任选的启动子、酵母来源的IRES增强子（如ScGPR1、ScFLO8、ScNCE102、ScMSN1、KlFLO8、KlNCE102、KlMSN1）以及外源蛋白的编码序列构成的核酸构建物，在酵母体外蛋白质合成体系中应用本发明的核酸构建物，所合成的荧光素酶活性的相对光单位值(RLU)非常高。