一种DNA连接的方法及其应用

    公开(公告)号:CN113481196B

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202110737591.0

    申请日:2021-06-30

    Inventor: 杨神州 万成 任军

    Abstract: 本发明提供了一种DNA连接的方法及其应用。本发明首先设计了DNA连接用片段,其包括第一DNA片段和/或第二DNA片段。本发明设计的DNA片段不能发生自连接,且与待测DNA的连接有较好的方向性,将待测DNA经过酶切后,在DNA连接酶的作用下与本发明的DNA连接用片段进行连接,按照3’端至5’端的顺序形成第一DNA片段‑待测DNA‑第二DNA片段的结构。本发明的技术特别适用于痕量DNA的连接、DNA定量测定与测序文库的构建。

    一种用于检测EML4-ALK、ROS1和RET融合基因突变的方法

    公开(公告)号:CN108103175B

    公开(公告)日:2021-09-17

    申请号:CN201810001999.X

    申请日:2018-01-02

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体地涉及一种通过文库构建并测序一次性检测EML4‑ALK,ROS1和RET融合基因突变的方法。本发明能在3小时内,由1‑2000个新鲜组织细胞,10pg‑20ng经提取的总RNA,或血浆游离RNA为起始,在ALK,ROS1,RET特异性引物与逆转录酶的作用下对其中包含融合型信息的mRNA进行逆转录并获得cDNA第一链,而后以模板转换技术在cDNA的3’端添加一段接头序列(带有分子标签)并进行cDNA二链生成,而后以接头区段为引物锚定位点进行指数扩增的同时在cDNA两端加上Illumina文库接头,以获得符合下游分析要求的高质量cDNA文库。

    一种DNA连接的方法及其应用

    公开(公告)号:CN113481196A

    公开(公告)日:2021-10-08

    申请号:CN202110737591.0

    申请日:2021-06-30

    Inventor: 杨神州 万成 任军

    Abstract: 本发明提供了一种DNA连接的方法及其应用。本发明首先设计了DNA连接用片段,其包括第一DNA片段和/或第二DNA片段。本发明设计的DNA片段不能发生自连接,且与待测DNA的连接有较好的方向性,将待测DNA经过酶切后,在DNA连接酶的作用下与本发明的DNA连接用片段进行连接,按照3’端至5’端的顺序形成第一DNA片段‑待测DNA‑第二DNA片段的结构。本发明的技术特别适用于痕量DNA的连接、DNA定量测定与测序文库的构建。

    扩增DNA的方法
    8.
    发明授权

    公开(公告)号:CN105925675B

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN201610264059.0

    申请日:2016-04-26

    Abstract: 本申请涉及一种扩增基因组DNA的方法,包括:(a)提供第一反应混合物,包括包含基因组DNA的样本、第一引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶,其中所述第一引物从5’端到3’端包含通用序列和包括第一随机序列的第一可变序列;(b)将第一反应混合物置于第一温度循环程序获得预扩增产物;(c)提供第二反应混合物,包括预扩增产物、第二引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶,其中所述第二引物从5’端到3’端包含或由特定序列及所述通用序列组成;(d)将第二反应混合物置于第二温度循环程序进行扩增,获得扩增产物。本申请还涉及一种用于扩增基因组DNA的试剂盒。

    扩增DNA的方法
    9.
    发明公开

    公开(公告)号:CN105925675A

    公开(公告)日:2016-09-07

    申请号:CN201610264059.0

    申请日:2016-04-26

    Abstract: 本申请涉及一种扩增基因组DNA的方法,包括:(a)提供第一反应混合物,包括包含基因组DNA的样本、第一引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶,其中所述第一引物从5’端到3’端包含通用序列和包括第一随机序列的第一可变序列;(b)将第一反应混合物置于第一温度循环程序获得预扩增产物;(c)提供第二反应混合物,包括预扩增产物、第二引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶,其中所述第二引物从5’端到3’端包含或由特定序列及所述通用序列组成;(d)将第二反应混合物置于第二温度循环程序进行扩增,获得扩增产物。本申请还涉及一种用于扩增基因组DNA的试剂盒。

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