公开(公告)号：CN104542277A

公开(公告)日：2015-04-29

申请号：CN201410795962.0

申请日：2014-12-19

Applicant: 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所

Inventor： 高美萍 ,  陈丽娟 ,  江文 ,  韦绍龙 ,  蔡炳华 ,  唐军 ,  桂杰 ,  何芳练 ,  杨柳 ,  董伟清 ,  闭志强 ,  欧昆鹏

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种慈姑组培苗快速繁殖培养方法和培养基配方，该方法将脱毒的慈姑外植体培养3周后接种入间歇浸没式生物反应器中，利用间歇浸没式培养方法，持续输入过滤空气，使用不添加糖的液体继代培养基对慈姑组培苗进行培养。本发明采用半自动化，减少了人工操作，降低了组培苗的污染率，并大大提高了慈姑组培苗的增殖率。本发明采用匍匐茎做外植体，采集保存方便，减少慈姑球茎用种量、降低了生产成本和劳动力成本，可在短时间内获得大量组培苗，生产周期缩短，效率高，适于工厂化生产。

公开(公告)号：CN107299108A

公开(公告)日：2017-10-27

申请号：CN201610791295.8

申请日：2016-08-31

Applicant: 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所

Inventor： 颜梅新 ,  江文 ,  欧昆鹏 ,  桂杰 ,  董伟清 ,  高美萍 ,  何芳练 ,  张尚文 ,  王艳

IPC: C12N15/80 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的茭白黑粉菌的遗传转化方法，以茭白黑粉菌孢子为转化受体材料，将含有双元载体的根癌农杆菌与茭白黑粉菌孢子混合后共培养，用抗生素筛选，获得抗性转化子。该法操作简单、转化效率高且稳定性好，以此构建茭白黑粉菌突变体库，为筛选茭白黑粉菌二型态转换突变体提供了丰富的筛选菌源，同时为克隆茭白黑粉菌二型态转换基因以及茭白黑粉菌与茭白植株互作相关基因提供了手段，对阐明茭白的孕茭机制和推进茭白育种工作具有重要意义。

公开(公告)号：CN104542277B

公开(公告)日：2017-01-11

申请号：CN201410795962.0

申请日：2014-12-19

Applicant: 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所

Inventor： 高美萍 ,  陈丽娟 ,  江文 ,  韦绍龙 ,  蔡炳华 ,  唐军 ,  桂杰 ,  何芳练 ,  杨柳 ,  董伟清 ,  闭志强 ,  欧昆鹏

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种慈姑组培苗快速繁殖培养方法和培养基配方，该方法将脱毒的慈姑外植体培养3周后接种入间歇浸没式生物反应器中，利用间歇浸没式培养方法，持续输入过滤空气，使用不添加糖的液体继代培养基对慈姑组培苗进行培养。本发明采用半自动化，减少了人工操作，降低了组培苗的污染率，并大大提高了慈姑组培苗的增殖率。本发明采用匍匐茎做外植体，采集保存方便，减少慈姑球茎用种量、降低了生产成本和劳动力成本，可在短时间内获得大量组培苗，生产周期缩短，效率高，适于工厂化生产。

公开(公告)号：CN108812305A

公开(公告)日：2018-11-16

申请号：CN201810297303.2

申请日：2018-04-04

Applicant: 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所

Inventor： 高美萍 ,  韦绍龙 ,  颜梅新 ,  何芳练 ,  江文 ,  张尚文 ,  蒋慧萍 ,  黄诗宇 ,  林志城 ,  董伟清 ,  王艳

IPC: A01H4/00 ,  A01G31/00

Abstract: 本发明公开了一种获取无菌慈姑外植体的方法及其应用，该方法包括以下步骤：(1)将经过消毒的慈姑球茎放入河沙中培养40-50天后，取萌发的匍匐茎；(2)将上述萌发的匍匐茎冲洗干净后，采集匍匐茎的茎尖，在所述茎尖上剪取出第一茎段，将所述第一茎段置于无菌室5-10min；以及(3)在超净台上在所述第一茎段上截取出第二茎段，将所述第二茎段用75％的酒精浸没，进而用无菌水冲洗，再用0.1％的氯化汞消毒或2％次氯酸钠浸泡，然后用无菌水冲洗后，沥干封存于经灭菌的培养瓶内供接种用，该方法所获取到的慈姑外植体污染率低，增殖率高，且节约种球材料，具有较好的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN105969799B

公开(公告)日：2019-06-21

申请号：CN201610538815.4

申请日：2016-07-08

Applicant: 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所

Inventor： 颜梅新 ,  江文 ,  欧昆鹏 ,  桂杰 ,  董伟清 ,  高美萍 ,  何芳练 ,  张尚文

IPC: C12N15/84 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的荸荠秆枯病菌的遗传转化方法，其特征在于以荸荠秆枯病菌分生孢子为转化受体材料，将含有双元载体的根癌农杆菌与荸荠秆枯病菌分生孢子混合后共培养，用抗生素筛选，获得抗性转化子，从而建立了荸荠秆枯病菌高效的遗传转化体系。该法操作简单、转化效率高且稳定性好，以此构建荸荠秆枯病菌突变体库，由农杆菌介导介导荸荠秆枯病菌的遗传转化获得的转化子可为筛选弱致病性和致病性缺陷的荸荠秆枯病菌菌株提供了丰富的筛选菌源，同时为克隆荸荠秆枯病菌致病性相关基因，深入研究荸荠秆枯病菌致病机理奠定基础。

公开(公告)号：CN105969799A

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201610538815.4

申请日：2016-07-08

Applicant: 广西壮族自治区农业科学院生物技术研究所

Inventor： 颜梅新 ,  江文 ,  欧昆鹏 ,  桂杰 ,  董伟清 ,  高美萍 ,  何芳练 ,  张尚文

IPC: C12N15/84 ,  A01H5/00

CPC classification number: C12N15/8205 ,  C12N15/8209

Abstract: 本发明公开了一种根癌农杆菌介导的荸荠秆枯病菌的遗传转化方法，其特征在于以荸荠秆枯病菌分生孢子为转化受体材料，将含有双元载体的根癌农杆菌与荸荠秆枯病菌分生孢子混合后共培养，用抗生素筛选，获得抗性转化子，从而建立了荸荠秆枯病菌高效的遗传转化体系。该法操作简单、转化效率高且稳定性好，以此构建荸荠秆枯病菌突变体库，由农杆菌介导介导荸荠秆枯病菌的遗传转化获得的转化子可为筛选弱致病性和致病性缺陷的荸荠秆枯病菌菌株提供了丰富的筛选菌源，同时为克隆荸荠秆枯病菌致病性相关基因，深入研究荸荠秆枯病菌致病机理奠定基础。