多能干细胞诱导分化获得间充质干细胞的方法

    公开(公告)号:CN114540282B

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202210165121.6

    申请日:2022-02-18

    Abstract: 本发明涉及细胞生物学领域,尤其涉及多能干细胞诱导分化获得间充质干细胞的方法。本发明提供了一种组分合理的培养基,从而使诱导时间缩短,过程简单,且诱导过程不需要再引入其他动物源性滋养层细胞,而是借助拟胚体诱导培养基和拟胚体内部细胞间的相互作用,最终获得了间充质干细胞。本发明方法具有普遍适用性;本发明方案诱导获得的间充质干细胞显微镜下观察具有典型的间充质干细胞形态,细胞增殖能力快,可连续传代培养20次以上,未见细胞体积增大或增殖减缓等衰老现象;且连续传代20次以上,所有间充质干细胞表面标志表达水平正常,具有成骨、成脂及成软骨分化潜能。

    一种外泌体冻存保护液及其制备方法

    公开(公告)号:CN112514892A

    公开(公告)日:2021-03-19

    申请号:CN202011560330.8

    申请日:2020-12-25

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种外泌体冻存保护液及其制备方法。该外泌体冻存保护液包括:含NaCl、KCl的Tris‑HCl缓冲溶液、葡萄糖、CD‑Lipid浓缩液、人血清白蛋白溶液、聚乙烯醇。本发明提供的外泌体冻存保护液的配比合理,成分简单,组成明确,加入所述冻存保护液的外泌体能在‑20℃的低温条件下,稳定保存6‑12个月,其生物学活性能维持其最大活性的90%;本发明冻存保护液中所有组分的构成明确,可以工业化生产,原材料价格便宜、易获取,具有低成本优势。

    一种动物脐带提取物及其提取方法和应用

    公开(公告)号:CN115125193B

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202110779475.5

    申请日:2021-07-09

    Abstract: 本发明涉及动物脐带提取技术领域,公开了一种动物脐带提取物及其提取方法和应用。本发明所述提取方法将动物脐带组织速冻,然后研磨出均匀粉状组织,加入缓冲液后在‑80℃和室温下反复冻融3次;冻融后的产物超声处理、离心,上清液继续超声处理,过滤,获得所述外泌体。本发明提取方法完全采用物理提取的方法并保持整个提取过程的低温环境,避免了目前其他制备工艺引入的酶类、有机溶剂或高温等影响终产品质量和活性的不利因素;同时,本发明提取工艺结合脐带的结构特点通过冻融、超声、过滤等物理学方法逐步去除其他成分,最终获得了富含外泌体的无菌产物,并通过鉴定实验及功能验证实验,充分证实了本发明已建立了稳定脐带外泌体的制备工艺。

    一种毛囊干细胞无血清培养基和培养方法

    公开(公告)号:CN117821382A

    公开(公告)日:2024-04-05

    申请号:CN202311870364.0

    申请日:2023-12-29

    Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种毛囊干细胞无血清培养基和培养方法。本发明提供的毛囊干细胞无血清培养基包括MEM非必需氨基酸溶液、MEM维生素溶液、L‑谷氨酰胺溶液、L‑谷胱甘肽、亚硒酸钠、重组人血白蛋白、重组人胰岛素、重组人转铁蛋白、重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人血小板衍生生长因子‑AB、重组人上皮调节蛋白、重组人过氧化氢酶、L‑抗坏血酸、(+)‑α‑生育酚乙酸酯、茴香霉素、皮质脂酮、左旋肉碱、D‑半乳糖、乙醇胺、亚油酸、亚麻酸、孕酮、腐胺以及基础培养基,化学成分明确,无外源外泌体污染,能够实现HFSCs体外快速增殖,多次传代细胞无空泡化或老化。

    无血清培养基及其制备方法和间充质干细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN110923196B

    公开(公告)日:2021-07-09

    申请号:CN201911219419.5

    申请日:2019-12-03

    Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域,特别涉及无血清培养基及其制备方法和间充质干细胞的培养方法。该培养基由如下成分组成:非必需氨基酸、谷氨酰胺、氢化可的松、地塞米松、聚乙烯醇、重组人胰岛素、重组人转铁蛋白、重组人表皮生长因子、重组人碱性成纤维细胞生长因子、重组人Wnt‑3a蛋白、重组人纤连蛋白、重组人层黏蛋白、L‑谷胱甘肽、L‑抗坏血酸、β‑巯基乙醇、乙醇胺、Pluronic F‑68、Tween 80、胆固醇、腺嘌呤、亚硒酸钠、基础培养基。本发明发现聚乙烯醇可替代无血清培养基中血清白蛋白的载体作用,有效提高间充质干细胞的增殖能力,其性能比血清白蛋白更稳定,可有效解决干细胞增殖与传代能力下降的问题。

    一种人胚胎干细胞向内皮细胞诱导分化的方法

    公开(公告)号:CN110938584A

    公开(公告)日:2020-03-31

    申请号:CN201911166109.1

    申请日:2019-11-25

    Abstract: 本发明涉及干细胞技术领域,公开了一种人胚胎干细胞向内皮细胞诱导分化的方法。本发明所述方法将人胚胎干细胞利用分散酶和拟胚体形成培养基制备成拟胚体;然后将拟胚体用中胚层诱导培养基诱导为中胚层细胞;最后将中胚层细胞用内皮诱导培养基定向诱导为内皮细胞。本发明通过拟胚体+单层两种方法顺次诱导,成功从人胚胎干细胞获得高纯度的内皮细胞,然后通过内皮细胞的富集及扩增步骤,获得了具备内皮细胞典型形态、免疫表型正常、纯度高且能够在体外连续传代培养8次以上的高品质内皮细胞,可解决目前内皮细胞临床治疗剂量不足的瓶颈问题。

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