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公开(公告)号：CN102703492B
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201210219310.3
申请日：2012-06-29
Applicant: 广东省人民医院
Abstract: 本发明公开了一种TBX5蛋白的表达方法。包括如下步骤：（1）诱导表达：基于原核系统诱导表达，裂解菌体；（2）分离纯化：利用镍柱亲和层析来分离纯化所得菌体裂解上清中的TBX5蛋白。本发明采用高浓度的蛋白诱导表达方法，提高了细菌中目的蛋白的产量，裂解菌体过程中没有进行包涵体的变性和复性，而是直接从超声裂解的上清中纯化蛋白，使得目的蛋白的回收率和活性得到了最大程度的保持，而且通过优化洗脱方案使得目的蛋白的获取量较之现有方法也有了较大的提高。
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公开(公告)号：CN100340667C
公开(公告)日：2007-10-03
申请号：CN200410051403.5
申请日：2004-09-09
Applicant: 广东省人民医院
IPC: C12N15/79 , C12N15/861
Abstract: 本发明公开了用于RNA干扰研究的表达载体。本发明对真核表达载体和腺病毒穿梭质粒载体进行了启动子的序列改造。经过启动子改造的真核表达载体上有polIII启动子，可以在真核细胞中表达siRNA；经过启动子改造的腺病毒穿梭质粒载体上有一致的polIII启动子及两侧序列，可将构建于经过启动子改造的真核表达载体上的目的序列亚克隆到经过启动子改造的腺病毒穿梭质粒载体上，进而制备可表达siRNA的重组腺病毒质粒载体，在细胞及整体动物水平上进行RNA干扰的实验研究，可以大大缩短实验周期，提高研究效率。
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公开(公告)号：CN1597966A
公开(公告)日：2005-03-23
申请号：CN200410051403.5
申请日：2004-09-09
Applicant: 广东省人民医院
IPC: C12N15/79 , C12N15/861
Abstract: 本发明公开了用于RNA干扰研究的表达载体。本发明对真核表达载体和腺病毒穿梭质粒载体进行了启动子的序列改造。经过启动子改造的真核表达载体上有polIII启动子，可以在真核细胞中表达siRNA；经过启动子改造的腺病毒穿梭质粒载体上有一致的polIII启动子及两侧序列，可将构建于经过启动子改造的真核表达载体上的目的序列亚克隆到经过启动子改造的腺病毒穿梭质粒载体上，进而制备可表达siRNA的重组腺病毒质粒载体，在细胞及整体动物水平上进行RNA干扰的实验研究，可以大大缩短实验周期，提高研究效率。
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公开(公告)号：CN1519325A
公开(公告)日：2004-08-11
申请号：CN03140362.X
申请日：2003-09-02
Applicant: 广东省人民医院
Abstract: 一种腺病毒穿梭质粒，其特征在于在腺病毒上有CMV增强子－心肌肌球蛋白轻链MLC－2V启动子及单独的绿色荧光蛋白GFP基因表达盒。本发明的质粒能够携带目的基因特异地在心肌细胞中表达，用能够便于检测质粒及其携带的目的基因的转染效率，检测腺病毒的滴度。
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