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公开(公告)号:CN108342334B
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN201810046055.4
申请日:2018-01-17
Applicant: 广东海纳川生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一株表达重组死亡素抗菌肽的毕赤酵母突变菌株,其保藏编号为GDMCC No.60304,所述突变菌株通过不针对菌体任何特定基因的紫外线辐射造成菌体基因组的随机突变,结合高通量的菌株筛选技术得到的,该菌株对死亡素抗菌肽的表达量显著,达到0.76g/L,是目前公开报道的最高水平,而且其生长性能和抑菌谱与出发菌株保持一致。
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公开(公告)号:CN107988289A
公开(公告)日:2018-05-04
申请号:CN201711157531.1
申请日:2017-11-20
Applicant: 广东海纳川生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种提高毕赤酵母分泌表达菌丝霉素表达量的方法,以毕赤酵母基因组为模板,扩增蛋白质二硫键异构酶基因PDI,用BstBI和EcoRI双酶切处理PDI片段,连接至同样经过BstBI和EcoRI双酶切处理的pPIC6αA载体片段,形成表达载体pPIC-PDI,通过在菌丝霉素表达菌株中表达蛋白质二硫键异构酶,促进菌丝霉素的3对二硫键形成正确的空间结构,进而使菌丝霉素顺利分泌表达至细胞外,达到提高菌丝霉素表达量的目的,使用所述方法使菌丝霉素的表达量提高了30%。
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公开(公告)号:CN107904182A
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201711083981.0
申请日:2017-11-07
Applicant: 广东海纳川生物科技股份有限公司
CPC classification number: C07K14/43563 , C12N15/66 , C12N15/815 , C12P21/02
Abstract: 本发明公开了一种表达重组Thanatin(死亡素)抗菌肽的毕赤酵母,所述的重组Thanatin抗菌肽包括GSKKPVPIIYCNRRTGKCQRM的氨基酸序列;本发明采用毕赤酵母进行死亡素的分泌表达,实现了死亡素的大量表达,降低了生产成本;所述的毕赤酵母生产菌株,死亡素最高表达量达到0.6g/L,是公开报道的最高水平,而且死亡素抗菌肽存在于发酵上清液中,不需要破碎细胞,只需要简单过滤出去菌体,即可得到杂蛋白很少的死亡素样品,便于后续死亡素的分离纯化,降低生产成本。本发明制备的死亡素样品对大肠杆菌和沙门氏菌有显著的抑菌作用。
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公开(公告)号:CN108342334A
公开(公告)日:2018-07-31
申请号:CN201810046055.4
申请日:2018-01-17
Applicant: 广东海纳川生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一株表达重组死亡素抗菌肽的毕赤酵母突变菌株,其保藏编号为GDMCC No.60304,所述突变菌株通过不针对菌体任何特定基因的紫外线辐射造成菌体基因组的随机突变,结合高通量的菌株筛选技术得到的,该菌株对死亡素抗菌肽的表达量显著,达到0.76g/L,是目前公开报道的最高水平,而且其生长性能和抑菌谱与出发菌株保持一致。
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公开(公告)号:CN107988295A
公开(公告)日:2018-05-04
申请号:CN201711156665.1
申请日:2017-11-20
Applicant: 广东海纳川生物科技股份有限公司
IPC: C12P21/04 , C07K14/435 , C12N15/81 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母发酵表达重组死亡素的生产工艺,所述工艺通过在BMGY培养基中进行一级种子液的培养,再通过将一级种子液接种于添加了0.4%微量元素溶液的无机盐培养基中进行二级种子的培养,然后将二级种子液再次接种在添加了0.4%微量元素溶液的无机盐培养基中高密度发酵培养,得高表达量,纯度高的所述死亡素抗菌肽;该工艺操作简单、转化率高,适合大规模生产。
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