公开(公告)号：CN119220506A

公开(公告)日：2024-12-31

申请号：CN202411243968.7

申请日：2024-09-05

Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 ,  华南农业大学

Inventor： 刘定祥 ,  古倩儿 ,  胡梓弘 ,  杨蓓 ,  何佳文 ,  陈瑞爱

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/50 ,  A61K39/17 ,  A61K39/215 ,  A61K39/295 ,  A61P31/22 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种表达IBV S蛋白的基因VII型NDV重组病毒及其制备方法和应用，该方法包括：在pBR322‑DHN3mF病毒基因组的P基因和M基因之间插入经修饰的S基因，得到重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2、rDHN3mF‑H120‑S6P、rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS中的任一种。本发明通过将适应细胞株的IBV‑P65的S2区域与QX型IBV MH20的S2区域进行替换，拯救出重组病毒rDHN3mF‑MH20S1‑IBVS2；通过将H120‑S蛋白上的第692位、第768位、第772位、第815位、第862位、第863位疏水性氨基酸均突变为脯氨酸拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P；在突变6个疏水性氨基酸为脯氨酸的基础上，将第533位‑第537位的氨基酸依次突变为甘氨酸、丝氨酸、丙氨酸、丝氨酸后拯救出重组病毒rDHN3mF‑H120‑S6P‑GSAS。将拯救出的三株重组病毒分别感染BHK‑21细胞，经WB验证能检测到S蛋白以及NDV全蛋白的高效表达。