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公开(公告)号：CN112626050A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN112626050B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202011481714.0
申请日：2020-12-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种在水稻基因打靶中识别特异位点的SpCas9‑NRCH突变体及其应用。本发明在水稻基因打靶实验过程中，意外获得了一种新的SpCas9‑NRCH突变体，发现利用该SpCas9‑NRCH基因进行水稻剪切，能够识别特异位点。并且本发明提供一种基于该基因构建的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用所获得的SpCas9‑NRCH构建植物表达载体，构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的DNA双链剪切，实现了水稻基因打靶，并且以高突变效率获得转基因水稻植株。
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公开(公告)号：CN118599972A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410695170.X
申请日：2024-05-31
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
IPC: C12Q1/6858 , C12M1/34 , C12M1/00
Abstract: 本发明公开了一种多农作物同时进行SSR分子标记检测方法及装置，涉及分子标记检测技术领域，包括：DNA快速提取及质量检测；PCR反应体系及扩增程序；电泳。DNA快速提取及质量检测的步骤还包括：每个作物随机取96棵幼苗，每棵幼苗或下胚轴取约0.8cm×0.8cm大小的样品，放入PCR板中，加入0.25mol/L的NaOH溶液20μl，放进水浴锅中99℃煮2min，然后加入0.25mol/LTris‑HCl溶液30μl后冷却，用核酸蛋白分析仪检测DNA的浓度和质量，DNA浓度在15‑50ng/uL，DNA的质量A260/A280在1.8‑2.0范围内。本发明利用不同作物的不同PCR产物的片段大小的区别，进行多重电泳，节约实验试剂的同时又提高检测效率，达到节本增效的效果，多重电泳方法，节约了劳动力，大幅提高工作效率。
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公开(公告)号：CN104087578A
公开(公告)日：2014-10-08
申请号：CN201410320538.0
申请日：2014-07-07
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种与水稻白叶枯病抗性基因紧密连锁的分子标记、引物及其应用，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。所述引物对的引物1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述引物2的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。在用于水稻白叶枯病检测时，通过PCR扩增，若所得PCR扩增产物为98bp碱基片段，则待测水稻为白叶枯病抗性品种，若所得PCR扩增产物为103bp碱基片段，则待测水稻为白叶枯病感病品种。本发明方法可以对白叶枯病抗性水稻进行早期世代选择而缩短育种周期，能够较快地筛选出抗白叶枯病的水稻材料，可广泛应用于水稻的辅助育种。
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公开(公告)号：CN103627786A
公开(公告)日：2014-03-12
申请号：CN201310305714.9
申请日：2013-07-19
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6895 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明公开了一种甜瓜种子纯度检验的方法，特别是一种利用SSR分子标记对金露三号甜瓜种子进行纯度检验的方法。其利用一对SSR引物FLWSSRL和FLWSSRR对甜瓜杂交品种金露三号的父母本和杂交一代的基因组DNA进行扩增和琼脂糖凝胶电泳分离，找出杂交一代与父母本差异的特征谱带，通过受检种子纯度计算，对金露三号杂一代种子样品进行检验，其检验的纯度经与田间种植鉴定的纯度对照比较，二者的结果高度一致。适用于对金露三号及其亲本真实性和种子纯度的检验。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102181540B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201110079445.X
申请日：2011-03-31
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种棉花种子纯度检验的方法，特别是一种利用SSR分子标记对抗虫杂交棉国丰棉198棉花种子进行纯度检验的方法。其利用一对SSR引物P1和P2对棉花杂交品种国丰棉198的父母本和杂交一代的基因组DNA进行扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，找出杂交一代与父母本差异的特征谱带，通过受检种子纯度计算，对国丰棉198杂一代种子样品进行检验，其检验的纯度经与田间种植鉴定的纯度对照比较，二者的结果高度一致。适用于对国丰棉198及其亲本真实性和种子纯度的检验。
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公开(公告)号：CN102220428A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110121335.5
申请日：2011-05-11
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用SSR法对两系杂交水稻种子进行纯度检验的方法，特别是一种利用SSR分子标记对丰两优一号或者丰两优香一号种子进行纯度检验的方法。其利用引物P1和P2分别对两系杂交水稻品种丰两优一号及其父母本，或者丰两优香一号及其父母本的基因组DNA进行扩增和琼脂糖电泳分离，找出杂交一代与父母本差异的特征谱带，通过受检种子纯度计算，对丰两优一号或丰两优香一号样品进行检验，其检验的纯度经与田间种植鉴定的纯度对照比较，二者的结果高度一致。适用于对丰两优一号或丰两优香一号两系杂交水稻及其亲本真实性和品种纯度的检验。
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公开(公告)号：CN118901326A
公开(公告)日：2024-11-08
申请号：CN202410943799.1
申请日：2024-07-15
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
Abstract: 本发明涉及农学技术领域，尤其涉及一种玉米种子无土培养杀菌剂试剂盒及无土培养方法。所述试剂盒由4%~6%（v/v）84消毒液水溶液和0.2‰~0.4‰（v/v）H2O2组成。本发明的玉米种子无土培养杀菌剂试剂盒，能够效阻止和防止霉菌等微生物对玉米种子在无土培养过程中的侵害，而且对玉米种子无毒害作用，此外本发明的杀菌剂组合能够加快玉米胚的发育，使玉米种子可以在无土培养环境下正常生长发育。采用本发明的玉米种子无土培养方法，玉米种子在培养7天后污染率仍然能够控制在20%以内，远远低于文献中的污染率。
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公开(公告)号：CN102181540A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110079445.X
申请日：2011-03-31
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种棉花种子纯度检验的方法，特别是一种利用SSR分子标记对抗虫杂交棉国丰棉198棉花种子进行纯度检验的方法。其利用一对SSR引物P1和P2对棉花杂交品种国丰棉198的父母本和杂交一代的基因组DNA进行扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，找出杂交一代与父母本差异的特征谱带，通过受检种子纯度计算，对国丰棉198杂一代种子样品进行检验，其检验的纯度经与田间种植鉴定的纯度对照比较，二者的结果高度一致。适用于对国丰棉198及其亲本真实性和种子纯度的检验。
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公开(公告)号：CN103409409A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310304147.5
申请日：2013-07-19
Applicant: 合肥丰乐种业股份有限公司
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种快速提取瓜类基因组DNA的方法，特别是一种利用NaOH和异丙醇快速、简便的大规模提取瓜类植物组织基因组DNA的方法。其利用96孔PCR扩增板在传统碱煮法提取后，使用异丙醇对提取产物进行沉淀提纯，大幅度提高了瓜类基因组DNA的提取质量、提取速度及提取规模，满足了后续进行的瓜类作物育种改良、品种纯度分子标记鉴定等相关项目对瓜类基因组DNA的需要；同时，本方法工艺步骤简单、易于操作且组织需求小，特别适合对瓜类基因组DNA大批量的提取。
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