公开(公告)号：CN114540415A

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN202210145226.5

申请日：2022-02-17

Applicant: 安徽大学

Inventor： 秦曦明 ,  沈隆庚 ,  田田 ,  殷凡凡 ,  周琴

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  C12N15/10 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种Bmal1基因突变细胞株及其构建方法和应用，本发明将筛选后突变Bmal1基因的细胞株，提取基因组扩增Bmal1基因组编辑区域，扩增产物后经PCR纯化回收后测序。测序结果显示Bmal1基因组92478位到92490位被编辑，对应的外显子为第13个外显子的156位至165位，由CCACAACCAGCGA序列编辑为TCGC序列。经过脱靶检测，其他位置均为未发生编辑。本发明构建得到的Bmal1基因突变细胞株在对细胞的昼夜节律和细胞周期的产生了影响。实验表明细胞株NIH3T3 B1‑B10 G5相较于野生型细胞，细胞周期在G2/M期停滞，差异极为显著。