一种基于必需基因快速优化大肠杆菌启动子的方法

    公开(公告)号:CN115216476A

    公开(公告)日:2022-10-21

    申请号:CN202210940388.8

    申请日:2022-08-06

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种基于必需基因快速优化大肠杆菌启动子的方法,涉及合成生物学、代谢工程技术领域,特别是在E.coli WM3064中基于dapA基因快速优化目标启动子的方法。首先构建含有目标启动子、必需基因dapA基因和核糖体结合位点RB0033的质粒,根据目标启动子序列,设计基于“‑10区”和“‑35区”序列的突变引物;然后以引物PCR扩增模板质粒,得到表达必需基因的启动子文库的质粒;最后将质粒转入宿主细胞中,得到dapA基因表达不同的突变体;经过多次传代,细菌可以通过生长竞争,筛选出必需基因表达最高的启动子。本发明可以在细菌最适生长条件下筛选出基因表达的最强启动子,具有操作简单、耗时少、成本低等优点。

    一种固定化异化金属还原细菌驱动的生物产氢-纳米钯耦合降解卤代有机污染物的方法

    公开(公告)号:CN114395550A

    公开(公告)日:2022-04-26

    申请号:CN202210045753.9

    申请日:2022-01-16

    Applicant: 安徽大学

    Abstract: 一种固定化异化金属还原细菌驱动的生物产氢‑纳米钯耦合降解卤代有机污染物的方法,涉及卤代有机污染物降解技术领域。利用异化金属还原菌的胞外还原能力,在海藻酸钠固定化微囊体中,实现纳米钯的生物合成并负载于微囊体中,从而构建出异化金属还原细菌‑纳米钯的耦合体系;利用纳米钯活化异化金属还原菌厌氧代谢产生的氢气,产生活性氢以实现卤代有机污染物的高效脱卤降解。这种一体化耦合降解方法解决了卤代有机污染物的连续流生物修复难题,通过微生物代谢产氢解决了外源通入难溶性氢气所造成的操作危险和成本浪费,能够实现高效原位脱卤。本发明的降解方法在有机卤代污染物的环境修复以及异化金属还原菌的环境应用领域有很强的实际应用价值。

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