基于HCR的检测沙门氏菌多价适配体的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN116087508B

    公开(公告)日:2025-02-11

    申请号:CN202211081913.1

    申请日:2022-09-06

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于HCR的检测沙门氏菌多价适配体的制备方法其应用,特点是包括以下步骤:1)将生物素化发夹DNA1、DNA2与生物素化沙门氏菌适配体分别经退火前处理;2)将触发链DNA与生物素化发夹DNA1、DNA2混合,在37℃下过夜反应,得到HCR骨架溶液,然后在HCR骨架溶液中加入生物素化沙门氏菌适配体反应得到检测沙门氏菌多价适配体溶液,其检测方法为将沙门氏菌待测溶液添加到高吸附酶标板上后,依次加入检测沙门氏菌多价适配体溶液、链酶亲和素化辣根过氧化物酶和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺显色液,经避光显色后终止反应,对待测溶液中沙门氏菌浓度进行定量检测;优点是灵敏度高、特异性强。

    一种基于纳米银介导的可视化定量检测大肠杆菌的方法

    公开(公告)号:CN113295660B

    公开(公告)日:2023-11-24

    申请号:CN202110380208.0

    申请日:2021-04-09

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米银介导的可视化定量检测大肠杆菌的方法,特点是包括以下步骤:1)将含大肠杆菌待测溶液与大肠杆菌多克隆抗体修饰的免疫磁珠溶液混合后反应,再用磷酸盐缓冲液重复清洗3次再分散,加入大肠杆菌单克隆抗体修饰的纳米银溶液混合反应后,清洗再磁分离后得到磁珠‑细菌‑纳米银三明治结构沉淀;2)加入过氧化氢溶液反应15分钟后进行磁分离,将量子点荧光试纸条的层析纸朝下且吸水纸朝上插入银离子溶液中,反应15分钟后,在紫外灯光下,根据荧光猝灭条带长度与大肠杆菌O157:H7浓度之间的定量关系,计算获得待测溶液中大肠杆菌含量,优点是特异性好、灵敏度高、成本低且检测结果可视化。

    基于HCR的检测沙门氏菌多价适配体的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN116087508A

    公开(公告)日:2023-05-09

    申请号:CN202211081913.1

    申请日:2022-09-06

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于HCR的检测沙门氏菌多价适配体的制备方法其应用,特点是包括以下步骤:1)将生物素化发夹DNA1、DNA2与生物素化沙门氏菌适配体分别经退火前处理;2)将触发链DNA与生物素化发夹DNA1、DNA2混合,在37℃下过夜反应,得到HCR骨架溶液,然后在HCR骨架溶液中加入生物素化沙门氏菌适配体反应得到检测沙门氏菌多价适配体溶液,其检测方法为将沙门氏菌待测溶液添加到高吸附酶标板上后,依次加入检测沙门氏菌多价适配体溶液、链酶亲和素化辣根过氧化物酶和3,3',5,5'‑四甲基联苯胺显色液,经避光显色后终止反应,对待测溶液中沙门氏菌浓度进行定量检测;优点是灵敏度高、特异性强。

    一种基于NTri的三价适配体比色-荧光双信号检测沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN117405885A

    公开(公告)日:2024-01-16

    申请号:CN202311191011.8

    申请日:2023-09-15

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于NTri的三价适配体比色‑荧光双信号检测沙门氏菌的方法,特点是包括将链酶亲和素化纳米磁珠溶液与生物素化适配体溶液混合,加入D‑生物素进行封闭后洗涤再复溶于磷酸盐缓冲液,得到用于捕获沙门氏菌的适配体磁珠溶液的步骤;将四条单链DNA溶液混合,并用TMS缓冲液定容后,将溶液于95℃加热4分钟并迅速降温得到基于NTri的三价适配体的步骤;取适配体磁珠溶液与待测沙门氏菌溶液混合,加入基于NTri的三价适配体溶液制备得到磁珠‑沙门氏菌‑NTri三明治复合物的步骤;最后进行比色法和荧光法检测,计算得到待测溶液中沙门氏菌浓度的步骤,优点是灵敏度高、特异性强且准确性好。

    一种基于纳米银介导的可视化定量检测大肠杆菌的方法

    公开(公告)号:CN113295660A

    公开(公告)日:2021-08-24

    申请号:CN202110380208.0

    申请日:2021-04-09

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米银介导的可视化定量检测大肠杆菌的方法,特点是包括以下步骤:1)将含大肠杆菌待测溶液与大肠杆菌多克隆抗体修饰的免疫磁珠溶液混合后反应,再用磷酸盐缓冲液重复清洗3次再分散,加入大肠杆菌单克隆抗体修饰的纳米银溶液混合反应后,清洗再磁分离后得到磁珠‑细菌‑纳米银三明治结构沉淀;2)加入过氧化氢溶液反应15分钟后进行磁分离,将量子点荧光试纸条的层析纸朝下且吸水纸朝上插入银离子溶液中,反应15分钟后,在紫外灯光下,根据荧光猝灭条带长度与大肠杆菌O157:H7浓度之间的定量关系,计算获得待测溶液中大肠杆菌含量,优点是特异性好、灵敏度高、成本低且检测结果可视化。

    基于HCR介导的多价适配体和CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN116735867A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202310426511.9

    申请日:2023-04-20

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了基于HCR介导的多价适配体和CRISPR‑Cas12a系统检测沙门氏菌的方法,特点是包括以下步骤:1)将链酶亲和素纳米磁珠与生物素化适配体混合,得到适配体磁珠;2)将触发链、发夹DNA H1、发夹DNA H2混合反应得到HCR支架,随后加入适配体得到基于HCR的多价适配体结构,其检测方法是通过适配体磁珠对沙门氏菌进行分离富集,并加入基于HCR的多价适配体得到磁珠‑沙门氏菌‑HCR三明治结构,随后加入CRISPR‑Cas12a体系,在37℃下反应1小时后得到增强的荧光信号,实现对待测溶液中沙门氏菌的检测,优点是灵敏度高、特异性强且准确性好。

    一种基于BCA-RPA和CRISPR-Cas12a系统检测鼠伤寒沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN113265477A

    公开(公告)日:2021-08-17

    申请号:CN202110380242.8

    申请日:2021-04-09

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于BCA‑RPA和CRISPR‑Cas12a系统检测鼠伤寒沙门氏菌的方法,特点是包括以下步骤:将纳米磁珠探针溶液和AuNPs探针溶液同时加入到含鼠伤寒沙门氏菌的待测溶液中,于室温下震荡反应45分钟后,磁分离洗涤3次后,复溶于无酶水中,即得到MNB探针‑细菌‑AuNPs探针三明治结构,将MNB探针‑细菌‑AuNPs探针三明治结构进行RPA扩增反应,在37℃反应5分钟,反应结束后,在蓝光下观察荧光进行肉眼检测或者用酶标仪定量检测,根据鼠伤寒沙门氏菌不同浓度下对应的荧光强度值得到的曲线,得到待测溶液中鼠伤寒沙门氏菌浓度值,优点是简便快速、灵敏度高以及可视化检测。

    一种TDN介导的三维四价适配体辅助CRISPR-Cas12a系统检测沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN117230157A

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202310967241.2

    申请日:2023-08-03

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种TDN介导的三维四价适配体辅助CRISPR‑Cas12a系统检测沙门氏菌的方法,特点是包括以下步骤:1)将链酶亲和素化纳米磁珠与生物素化适配混合,得到适配体磁珠;2)将四条单链DNA混合反应得到TDN刚性纳米结构,随后加入适配体得到基于TND的三维四价适配体结构;3)首先通过适配体磁珠对沙门氏菌进行分离和富集,随后加入基于TDN的三维四价适配体结构得到“磁珠‑沙门氏菌‑TDN”三明治结构,最后加入CRISPR‑Cas12a体系,在37℃下反应1小时后得到明显增强的荧光信号,实现不同样品中的沙门氏菌检测,优点具有灵敏度高、特异性强和准确性好。

    一种基于BCA-RPA和CRISPR-Cas12a系统检测鼠伤寒沙门氏菌的方法

    公开(公告)号:CN113265477B

    公开(公告)日:2022-07-19

    申请号:CN202110380242.8

    申请日:2021-04-09

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于BCA‑RPA和CRISPR‑Cas12a系统检测鼠伤寒沙门氏菌的方法,特点是包括以下步骤:将纳米磁珠探针溶液和AuNPs探针溶液同时加入到含鼠伤寒沙门氏菌的待测溶液中,于室温下震荡反应45分钟后,磁分离洗涤3次后,复溶于无酶水中,即得到MNB探针‑细菌‑AuNPs探针三明治结构,将MNB探针‑细菌‑AuNPs探针三明治结构进行RPA扩增反应,在37℃反应5分钟,反应结束后,在蓝光下观察荧光进行肉眼检测或者用酶标仪定量检测,根据鼠伤寒沙门氏菌不同浓度下对应的荧光强度值得到的曲线,得到待测溶液中鼠伤寒沙门氏菌浓度值,优点是简便快速、灵敏度高以及可视化检测。

    一种遥控器
    10.
    实用新型

    公开(公告)号:CN202750360U

    公开(公告)日:2013-02-20

    申请号:CN201220336440.0

    申请日:2012-07-12

    Applicant: 宁波大学

    Abstract: 本实用新型公开了一种遥控器,包括电源和带有操作按钮的遥控器本体,特点是:遥控器本体的上表面设置有与电源连接的LED照明灯,遥控器本体的角部设置有贯穿遥控器本体的镂空部;优点是:该遥控器结构简单,便于使用者快速找到遥控器,同时便于使用者在光线较暗时的使用和操作。

Patent Agency Ranking