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公开(公告)号:CN113755560A
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202111201091.1
申请日:2021-10-15
Applicant: 宁夏农林科学院动物科学研究所(宁夏草畜工程技术研究中心)
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6893 , C12N15/11 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一种蓝氏贾第虫LAMP快速检测方法,属于生物技术领域。一种蓝氏贾第虫LAMP快速检测方法,包括以下步骤:根据NCBI中已有的蓝氏贾第虫序列,通过序列比对,多次试验的方法,筛选到可以用于蓝氏贾贾第虫LAMP的序列并设计LAMP引物;以蓝氏贾第虫、隐孢子虫、阿米巴原虫、芽囊原虫和弓形虫阳性样品基因组DNA作为模板进行引物的特异性试验,以超纯水为阴性对照,向反应管中加入1μL 1000×SYBR Green I,在自然光下用肉眼观察,同时用巢氏PCR进行验证;将蓝氏贾第虫阳性样本的总DNA进行倍比稀释后作为模板,分别用优化后的LAMP反应体系和巢氏PCR进行检测,进行引物的敏感性试验;采集新鲜犊牛粪便样本,提取DNA,分别用优化后的LAMP反应体系和巢氏PCR进行比较。