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公开(公告)号:CN102590376B
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201210022570.1
申请日:2012-02-01
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种糖蛋白组定量方法,具体步骤为:将来自不同疾病或者相同疾病不同阶段患者的血清样本分为两组,除去高丰度蛋白,测定蛋白浓度,取等蛋白量样本进行除盐和酶解;将所得的酶解产物进行凝集素亲和层析以得到相应的亚糖蛋白组,冻干;分别以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合固化胰酶进行C端标记,冻干后,再以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合N-糖酰胺酶进行N糖基化位点标记,冻干;将两组样本混合上样进行液相色谱-质谱检测,建立基于Mascot Distiller的自定义算法进行定量数据处理。本发明拥有足够的精确性和可重复性,在1∶10~10∶1的范围之内能够保持线性,可精确的反应样本中不同N-糖链结构糖型的糖蛋白变化。
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公开(公告)号:CN102590376A
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201210022570.1
申请日:2012-02-01
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种糖蛋白组定量方法,具体步骤为:将来自不同疾病或者相同疾病不同阶段患者的血清样本分为两组,除去高丰度蛋白,测定蛋白浓度,取等蛋白量样本进行除盐和酶解;将所得的酶解产物进行凝集素亲和层析以得到相应的亚糖蛋白组,冻干;分别以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合固化胰酶进行C端标记,冻干后,再以H218O和H216O制备的溶液重溶两组样本,联合N-糖酰胺酶进行N糖基化位点标记,冻干;将两组样本混合上样进行液相色谱-质谱检测,建立基于Mascot Distiller的自定义算法进行定量数据处理。本发明拥有足够的精确性和可重复性,在1∶10~10∶1的范围之内能够保持线性,可精确的反应样本中不同N-糖链结构糖型的糖蛋白变化。
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公开(公告)号:CN102191323A
公开(公告)日:2011-09-21
申请号:CN201110091077.0
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明涉及一种预测肝癌术后生存的实时定量PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括IL6基因扩增引物及荧光标记探针、HLA_DRA基因扩增引物及荧光标记探针、CSF1基因扩增引物及荧光标记探针、SPP1基因扩增引物及荧光标记探针以及TNF基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了IL6基因、HLA_DRA基因、CSF1基因、SPP1基因以及TNF基因可以作为标志物来预测肝癌术后生存率,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对原发性肝癌病人术后的组织mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。
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公开(公告)号:CN102191323B
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201110091077.0
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明涉及一种预测肝癌术后生存的实时定量PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括IL6基因扩增引物及荧光标记探针、HLA_DRA基因扩增引物及荧光标记探针、CSF1基因扩增引物及荧光标记探针、SPP1基因扩增引物及荧光标记探针以及TNF基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了IL6基因、HLA_DRA基因、CSF1基因、SPP1基因以及TNF基因可以作为标志物来预测肝癌术后生存率,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对原发性肝癌病人术后的组织mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。
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公开(公告)号:CN101519689A
公开(公告)日:2009-09-02
申请号:CN200810204364.6
申请日:2008-12-10
Applicant: 复旦大学附属中山医院 , 复旦大学生物医学研究院
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及肿瘤转移相关基因骨桥蛋白的多态性和单体型构建及其应用,具体涉及一种用于预测原发性肝癌病人预后的试剂盒,由纯化系统、扩增系统、单核苷酸多态性位点检测系统、5’→3’引物序列,3’→5’引物序列及测序引物组成。本发明还提供了一种肿瘤转移相关基因骨桥蛋白的单体型。本发明的检测试剂盒简便、快速且经济实用。对原发性肝癌病人预后进行评估,并及时采取综合手段干预,提高病人远期生存率,改善预后,方便于临床应用,为临床上进一步确定个体化治疗方案提供了有效的依据。
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公开(公告)号:CN101418343A
公开(公告)日:2009-04-29
申请号:CN200810204363.1
申请日:2008-12-10
Applicant: 复旦大学附属中山医院 , 复旦大学生物医学研究院
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供了一种用于预测早期原发性肝癌病人术后肝癌复发的试剂盒,包括反转录系统、扩增系统和引物探针系统,反转录系统由反转录酶、反转录体系缓冲液和RNA酶抑制剂组成,扩增系统由含Taq酶的miRNA表达定量检测混合液组成,引物探针系统包含has-miR-34a茎环结构引物、has-miR-34a扩增引物和荧光标记探针以及RNU6B茎环结构引物、RNU6B扩增引物和荧光标记探针。本发明检测定量准确,简便、快速且经济实用,且可进一步与其他分子指标相结合,为早期原发性肝癌复发诊断、预后预测提供综合性分子标记试剂盒,方便于临床应用。
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公开(公告)号:CN102206710B
公开(公告)日:2013-01-23
申请号:CN201110091076.6
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种预测肝癌术后转移与复发的实时PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括CXCL10基因扩增引物及荧光标记探针、FKBP10基因扩增引物及荧光标记探针、ASPH基因扩增引物及荧光标记探针、SPP2基因扩增引物及荧光标记探针和ENO2基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了CXCL10基因、FKBP10基因、ASPH基因、SPP2基因和ENO2基因可以作为预测肝癌术后转移与复发的标志物,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对肝癌患者术中切除的癌组织进行mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。相对于芯片技术或者分子杂交,该方法简便、快速且经济实用。
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公开(公告)号:CN101519689B
公开(公告)日:2012-04-25
申请号:CN200810204364.6
申请日:2008-12-10
Applicant: 复旦大学附属中山医院 , 复旦大学生物医学研究院
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及肿瘤转移相关基因骨桥蛋白的多态性和单体型构建及其应用,具体涉及一种用于预测原发性肝癌病人预后的试剂盒,由纯化系统、扩增系统、单核苷酸多态性位点检测系统、5’→3’引物序列,3’→5’引物序列及测序引物组成。本发明还提供了一种肿瘤转移相关基因骨桥蛋白的单体型。本发明的检测试剂盒简便、快速且经济实用。对原发性肝癌病人预后进行评估,并及时采取综合手段干预,提高病人远期生存率,改善预后,方便于临床应用,为临床上进一步确定个体化治疗方案提供了有效的依据。
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公开(公告)号:CN102206710A
公开(公告)日:2011-10-05
申请号:CN201110091076.6
申请日:2011-04-12
Applicant: 复旦大学附属中山医院
Abstract: 本发明提供了一种预测肝癌术后转移与复发的实时PCR微阵列芯片试剂盒,其特征在于,包括CXCL10基因扩增引物及荧光标记探针、FKBP10基因扩增引物及荧光标记探针、ASPH基因扩增引物及荧光标记探针、SPP2基因扩增引物及荧光标记探针和ENO2基因扩增引物及荧光标记探针。本发明发现了CXCL10基因、FKBP10基因、ASPH基因、SPP2基因和ENO2基因可以作为预测肝癌术后转移与复发的标志物,并提供了相应的试剂盒,通过实时定量PCR微阵列芯片技术对肝癌患者术中切除的癌组织进行mRNA水平的检测,具有高通量、高敏感性和高均一性等优点。相对于芯片技术或者分子杂交,该方法简便、快速且经济实用。
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