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公开(公告)号：CN102424813A
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201110438641.1
申请日：2011-12-25
Applicant: 复旦大学附属中山医院
IPC: C12N5/074
Abstract: 本发明提供了一种高纯度小鼠骨骼肌卫星细胞的简易提取方法,其特征在于,具体步骤为：第一步：于小鼠四肢肌注射盐酸布比卡因；第二步：处死小鼠，剔出四肢肌肉，去除血管、脂肪及筋膜，将肌肉剪成0.5～1.5mm3小粒；第三步：加入混合消化酶孵化，过滤细胞悬液，将所得滤液离心，弃上清，细胞沉淀用生长培养基重悬；第四步：依次将60%Percoll分离液、20%Percoll分离液、细胞悬液沿管壁注入，用长头吸管小心吸出20%Percoll分离液与60%Percoll分离液分界面的细胞悬液，离心，得细胞沉淀；第五步：将细胞沉淀培养,得到小鼠骨骼肌卫星细胞。本发明方法简易、快速，骨骼肌卫星细胞纯化率及产率高，具有较高的增殖及分化能力，可进行体外基因修饰或体内移植。
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