一种异源表达大球盖菇β-葡萄糖苷酶基因的方法

    公开(公告)号:CN112646797B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202110087099.3

    申请日:2021-01-22

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种异源表达大球盖菇β‑葡萄糖苷酶基因的方法。该方法包括如下步骤:(1)在大球盖菇基因组中获得大球盖菇β‑葡萄糖苷酶,并设计引物;(2)提取大球盖菇RNA,反转录成CDNA作为模板,然后进行PCR扩增;(3)使用内切酶对扩增的EC2基因片段、载体质粒PMAL‑c5g分别进行双酶切,并进行片段回收;(4)连接目的片段和空载体片段;(5)连接体系转入感受态细胞转化培养,获得重组载体;(6)将重组载体转至大肠杆菌,选取表达β‑葡萄糖苷酶的大肠杆菌工程菌株。本发明改造的E.coil Rosetta(DE3)重组菌株能够更高效的表达β‑葡萄糖苷酶蛋白,对农业废弃资源进行降解利用。

    一种来源于水稻的受衰老信号诱导的OsPaO启动子及其应用

    公开(公告)号:CN103468679A

    公开(公告)日:2013-12-25

    申请号:CN201310152163.7

    申请日:2013-04-27

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明基因工程技术领域,具体为一种来源于水稻的受衰老信号诱导的OsPaO启动子及其应用。本发明的启动子来源于水稻叶片衰老相关基因OsPaO,其DNA序列为SEQIDNO:1所示。将编码目的产物基因的核酸序列与上述启动子片段融合得到重组DNA,用该种重组DNA转化获得的转基因植株中,目的基因的表达受衰老信号的诱导表达。本发明的启动子可以在衰老信号的诱导下启动目的基因的表达,可用于产量和品质性状的转基因改良。

    受化学物质烯丙异噻唑诱导的W-box元件及其应用

    公开(公告)号:CN1986796B

    公开(公告)日:2010-05-19

    申请号:CN200610147253.7

    申请日:2006-12-14

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属基因工程技术领域,具体涉及一种分离和利用核酸的顺式元件,该元件来源于大麦中抗病相关基因上游的启动子序列。将编码所希望的目的产物基因的核苷酸序列和单元件或其顺式串连重复后得到的启动子融合得到重组DNA,用这种重组DNA转化植物,将得到新的转基因植物。在新的植物中该重组DNA中的目的基因的表达受烯丙异噻唑probenazole(3-allyloxy-1,2-benzisothiazole-1,1-dioxide,PBZ)或其活性代谢物1,2-benzisothiazole-1,1-dioxide(BIT)的化学诱导物调控。

    一种异源表达大球盖菇β-葡萄糖苷酶基因的方法

    公开(公告)号:CN112646797A

    公开(公告)日:2021-04-13

    申请号:CN202110087099.3

    申请日:2021-01-22

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种异源表达大球盖菇β‑葡萄糖苷酶基因的方法。该方法包括如下步骤:(1)在大球盖菇基因组中获得大球盖菇β‑葡萄糖苷酶,并设计引物;(2)提取大球盖菇RNA,反转录成CDNA作为模板,然后进行PCR扩增;(3)使用内切酶对扩增的EC2基因片段、载体质粒PMAL‑c5g分别进行双酶切,并进行片段回收;(4)连接目的片段和空载体片段;(5)连接体系转入感受态细胞转化培养,获得重组载体;(6)将重组载体转至大肠杆菌,选取表达β‑葡萄糖苷酶的大肠杆菌工程菌株。本发明改造的E.coil Rosetta(DE3)重组菌株能够更高效的表达β‑葡萄糖苷酶蛋白,对农业废弃资源进行降解利用。

    一种通过施加化学诱导剂提高草莓多重抗性的方法

    公开(公告)号:CN108142225A

    公开(公告)日:2018-06-12

    申请号:CN201711400239.8

    申请日:2017-12-22

    Applicant: 复旦大学

    CPC classification number: A01G7/06

    Abstract: 本发明属于蔬果病虫害防治技术领域,具体为一种通过施加化学诱导剂提高草莓多重抗性的方法。本发明中,施加的化学诱导剂为烯丙异噻唑,施加时将烯丙异噻唑混合在浇灌液中,然后将混合浇灌液施加于定植后15-20天的草莓根部;混合浇灌液中控制烯丙异噻唑的浓度为0.3-0.5 mM;可连续多次施加烯丙异噻唑3-4次。本发明可显著增强草莓对多重胁迫的抗性,减少草莓病害的发生;本发明方法操作简单,成本较低。

    一种调控叶片衰老和多重抗逆性的转录因子及其应用

    公开(公告)号:CN102775483A

    公开(公告)日:2012-11-14

    申请号:CN201210241983.9

    申请日:2012-07-13

    Applicant: 复旦大学

    CPC classification number: Y02A40/14

    Abstract: 本发明属于植物基因工程领域,具体涉及一种调控叶片衰老和多重抗逆性的转录因子与应用。本发明所提供的植物WRKY46蛋白,来源于拟南芥、杨树等物种(见图2所示),但不局限于这些物种,包括与拟南芥中AtWRKY46(氨基酸序列如SEQIDNO:2所示)的同源性高于30%的类似蛋白。拟南芥WRKY46蛋白的编码基因,是下列核苷酸序列之一:(1)序列表中的SEQIDNO:1;(2)编码序列表中SEQIDNO:2氨基酸序列的多核苷酸。本发明可为延缓叶片衰老、提高作物产量及多重抗逆性方面提供了蛋白资源和方法。

    不结球白菜叶绿素降解代谢调控相关蛋白及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN102276709A

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN201010519085.6

    申请日:2010-10-26

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体公开一种不结球白菜叶绿素降解代谢调控相关蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的叶绿素降解代谢调控相关蛋白,来源于不结球白菜,品种“夏冬青”,蛋白名称为BcNYE1,其氨基酸序列如SEQIDNO:2所示。不结球白菜叶绿素降解代谢调控相关蛋白BcNYE1的编码基因,其核苷酸序列为SEQIDNO:1所示,或者为编码SEQIDNO:2氨基酸序列的多核苷酸序列。本发明的基因可用于不结球白菜叶绿素降解分子机制研究,并用于植物滞绿性状改良,包括延缓植物叶片叶绿素降解及叶片衰老。

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